| ORIGINAL RESEARCH PAPER Durocher, D. et al. The molecular basis of FHA domain: phosphopeptide binding specificity and implications for phospho-dependent signalling mechanisms. Mol. Cell 6, 1169-1182 (2000) | | | FURTHER READING Durocher, D. et al. The FHA domain is a modular phosphopeptide recognition motif. Mol. Cell 4, 387-394 (1999) | | | WEB SITES |
Существует догма, согласно которой фосфотирозин является lego builder, тогда как фосфосерин и фосфотреонин конформационные переключатели. Daniel Durocher и др.получили определенные доказательства, что фосфорилированные серин/треонин также м. строить лего.
Courtesy of Steve Smerdon and Mike Yaffe, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, Massachusetts, USA.
Courtesy of Steve Smerdon and Mike Yaffe, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, Massachusetts, USA.
В 1999 установлено, что forkhead-associated ( ) домен - впервые выявленный в транскрипционных факторах, но присутствующий и во многих др. белках - является фосфопептидным распознающим мотивом. Они нашли оптимальные связывающие последовательности для некоторых FHA доменов, включая (FHA1 и FHA2) у дрожжей , которые связывают фосфорилированный в ответ на повреждение ДНК. Они нашли, что подобно фосфотирозин-связывающему домену, FHA домены распознают фосфотреонин в контексте фланкирующих аминокислотных последовательностей, так что индивидуальные FHA домены связываются специфически с разными пептидами. Связывание пептидов зависит абсолютно от фосфотреонина(его замещение фосфосерином блокирует связывание), а окружающие остатки отвечают за специфичность связывания. Напр., Rad53p's FHA1 домен предпочитает три остатка aspartate, стоящие ниже фосфотреонина (+3 положение), тогда как FHA2 домен предпочитает изолейцин. Др. остатки между -3 и +3 положениями также влияют на связывающее сродство, но имеются некоторые исключени, в целом же наиболее строгий отбор зависит от предпочтения FHA доменами остатков в положении +3.
Кристаллическая Rad53p's FHA1 домена, связанная с длинным пептидом, содержащим свои оптимальные связывающие последовательности, показывает, почему +3 остаток столь важен (рис.). Фосфотреонин и Arg+3 осуществляют наибольшее число прямых контактов с FHA доменом. Др. важным наблюдением является то, что FHA домены складываются идентично с тем, как складывается домен в транскрипционных факторах. Становится возможным выявление FHA-domain-связывающих белков.