| ORIGINAL RESEARCH PAPERS Zhao, J. et al. NPAT links cyclin E-Cdk2 to the regulation of replication-dependent histone gene transcription. Genes Dev. 14, 2283-2297 (2000) | PubMed | ISI | Ma, T. et al. Cell cycle-regulated phosphorylation of p220NPAT by cyclinE/Cdk2 in Cajal bodies promotes histone gene transcription. Genes Dev. 14, 2298-2313 (2000) | PubMed | ISI | FURTHER READING Ewan, M. E. Where the cell cycle and histones meet. Genes Dev. 14, 2265-2270 (2000) | PubMed | LINKS
Alzheimer Research Forum
|
Установлено, как киназа и ее регуляторный партнер координируют синтез гистонов и ДНК посредством субстрата для CDK2, названного .
Люди имеют два кластера гистоновых генов, на хромосоме 1 и 6, но транскрипционные факторы, управляющие экспрессией гистонов варьируют. Zhao и др. предположили, что д.б. 'master regulator' экспрессии гистонов. Имеея уже идентифицированный NPAT, они использовали иммунофлюоресценцию для изучения его клеточной локализации. Выявлены две маленькие точки NPAT в клетках вне фазы S, но 4 во время S фазы. Эта локализация перекрывалась с , компонентом ядерной органеллы, называемой тельцем Cajal или coiled body (Рис.) - это было подтверждено и др. Тельца Cajal часто ассоциируют с кластерами гистоновых генов, следовательно, выявляется связь между cyclin E-CDK2 и генами гистонов. Более того, показано, что NPAT's ассоциация с кластерами гистоновых генов на хромосоме 1 зависит от клеточного цикла, это объясняет, почему количество точек NPAT увеличивается во время S фазы.
Затем Zhao et al. нашли значительное усиление экспрессии с помощью промотора гистонового гена , когда ген NPAT ко-трансфицировали в клетки. NPAT усиливал иакже экспрессию промоторов. Для промотора H4 они сузили область, чувствительную к NPAT до последовательностей, которые связывают предполагаемый транкрипционный фактор, называемый H4TF-2. Мутации этих последовательностей, которые устраняют связывание H4TF-2 блокируют эффект NPAT, в то время как котрансфекция cyclin E- и CDK2-экспрессирующих плазмид усиливает NPAT-обусловленную активацию транскрипции гистоновых генов.
Ma и др. определили места CDK2 фосфориляции на NPAT, затем используя phospho-NPAT-специфические антитела, показали, что phospho-NPAT ко-локализуется с cyclin E и coilin в тельцах Cajal и что комбинация phospho-NPAT и cyclin E-CDK2 присутствует в тельцах Cajal только во время S phase. Более того, мутация NPAT's CDK2 phosphorylation сайта на аланин редуцирует способность активировать транскрипцию с промотора гистона 2B.
Итак, cyclin E-CDK2 задают последовательность, а NPAT гарантирует, что она будет выполнена.