Посещений:
Heterochromatin protein 1 (HP1)

Modulation of heterochromatin protein 1 dynamics in primary mammalian cells
Festenstein, R. et al.
Science 299, 719-721 (2003) | Article | PubMed


Cheutin, T. et al. Maintenance of stable heterochromatin domains by dynamic HP1 binding. Science 299, 721-725 (2003) | Article | PubMed
Heterochromatin protein 1 (HP1) считается как 'держатель' гетерохроматина — транкрипционно молчащей, конденсированной ДНК, которая обычно ассоциирует с центромерными областями. Считается, что делает он это поперечно связывая хроматин, создавая тем самым уплотненный хроматин, который непроницаем для транскрипционных активаторов. Две группы Richard Festenstein и Tom Misteli обратились к этому вопросу.
Обе группы изучали динамику HP1 — главного компонента гетерохроматина — используя fluorescence recovery after bleaching (FRAP) на клетках, которые экспрессируют green fluorescent protein (GFP)–HP1 изоформу α, β или γ слитые белки. Misteli и др. получили стабильную трансфицировнную иммортализованную Chinese hamster ovary (CHO) линию клеток, тогда как группа Festenstein получили трансгенных мышей, которые экспрессируют GFP–HP1β изоформу белка специфически в T клетках.
В CHO клетках, fluorescence recovery было быстрым для всех HP1 изоформ; полное восстанволение достигалось в течение 5 сек в менее плотном эухроматине, а в гетерхроматине ~60 сек. В покоящихся T клетках от трансгенных мышей восстановление было более медленным и неполным; ~70% восстанавливалось в течение 150–200 сек в гетерохроматине и ~90% в течение 90–100 сек в эухроматине. HP1 подвижность в гетерохроматине снижена по сравнению с эухроматином, это возможно отражает высокую плотность сайтов HP1-связывания в огетерохроматине. Неполное восстановление в покоящихся Т клетках указывает на присутствие неподвижной фракции HP1β молекул, которая выше в гетерохроматине, чем в эухроматине.
Для изучения влияния активации T-клеток — которая запускает активацию генов и индукцию клеточного цикла — на мобильность HP1 Festenstein и др. измеряли FRAP в T клетках, которые получены от мышей и активированы ex vivo. Подвижность GFP–HP1β значительно усиливалась и в гетерохроматине и эухроматине по сравнению с нестимулироваными клетками. Более того, немобильная HP1β фракция в гетерохроматине уменьшалась до ~10%. Время восстановления в гетерохроматине в активированных Т клетках (50–80 сек) было сходным с таковым в CHO клетках, а восстановление флюоресценции было практически полным — как и в CHO клетках.
Итак, очевидно, что HP1 связывается временно с гетерохроматином и эухроматином, это привело авт. к выводу, что гетерохроматин не является недоступным для др. факторов и что непрерывный обмен HP1 позволяет регуляторам транскрипции конкурировать за связывание, тем самым предопределяется судьба гетерохроматиновой области. Кроме того, увеличение подвижности HP1 в иммортализованных клетках и активированных Т клетках позволяет гетерохроматину реструктуироваться, это м. облегчать вступление в клеточный цикл и активацию транскрипции.
Сайт создан в системе uCoz