| |
|
|---|---|
| Борьба за промотор р15Онкобелок в компании с м. активировать транскрипцию генов, которые в общем стимулируют пролиферацию; но Myc м. выступать и как репрессор транскрипции. является белком, содержащим zinc-finger, который индуцирует арест клеточного цикла и активирует транскрипцию некоторых генов, которые репрессируются с помощью Myc. Staller и др. полагают, что Miz-1 м. активировать транскрипцию ингибитора cyclin-dependent kinase, они идентифицируют как мишень Miz-1. Делеционное картирование позволило выявить Miz-1-связывающую область в промоторе Cdkn2b, гена, кодирующего p15Ink4b. Ко-экспрессия Myc блокируется трансактивацией Cdkn2b с помощью Miz-1, а ко-иммунопреципитация выявила комплекс из Miz-1, Myc и Max. Авт. предположили, что Myc м. предупреждать экспрессию Miz-1, рекрутируя ко-активатор. Им оказался , который ингибирует способность Miz-1 активировать транскрипцию Cdkn2b, а Miz-1 ко-иммунопреципитируется с p300. Картирование p300-связывающего сайта на Miz-1 показало, что Myc и p300 оба соединяются с перекрывающимися самйтами на Miz-1, это объясняет как Myc блокирует рекрутирование p300 на промотор Cdkn2b.
Далее были получены химеры Myc и , который обладает активностью Myc's транскрипционного активатора, но не м. связываться с Miz-1. В отличие от дикого типа Myc, химеры не могли блокировать накопление p15Ink4b, и не могли трансформировать p53-/- клетки. Следовательно, онкогенная способность Myc зависит от его способности блокировать транскрипцию Cdkn2b.
Transforming growth factor-β ( также м. индуцировать экспрессию p15Ink4b путем активрования транскрипционных факторов Smad, но почему эта реакция блокируется с помощью избыточной экспресии c-Myc. Joan Seoane и др. обрабатывали кератиноциты с помощью TGF-β, что вело к подавлению Myc и снижению уровня комплекса Myc-Miz-1. Было показано, что TGF-β может активировать транскрипцию Cdkn2b, а также репрессию его транскрипции с помощью Myc. Резонно, что были наиболее вероятными кандидатами на этот двухчастный эффект TGF-β, авт. локализовали Smad-связывающую область в промоторе Cdkn2b, иммунопреципитацию Smad-содержащего комплексаиз этой области. Форсирование экспрессии Myc не предупреждает образование этого комплекса, но блокирет его способность трансактивировать Cdkn2b, так что способность Myc's репрессировать транскрипцию доминирует над способностью Smads активировать ее. Авт. идентифицировали четвертичную струетуру комплекса Myc, Miz-1 и Smad4, так что Myc и Smads не могут конкурировать за соединение с ордним и тем же сайтом на Miz. Наиболее вероятным объяснением являтся то, что способность Myc's репрессировать транскрипцию - по крайней мере Cdkn2b - обусловлена его способностью блокировать взаимодействие между Miz-1 и ко-активатором p300.
|