|
|
||
|---|---|---|
|
Репликация сопровождается ступенчатообразным паттерном сборки белков. Связывание 'origin-recognition complex' на инициаторных элементах ДНК сопровождается присоединением еще двух белков и Cdt1. Затем во время G1 эти белки рекрутируются в т.наз. комплекс MCM для образования 'pre-replication complex' (pre-RC). На этой стадии клетки, получают лицензию на репликацию, возможно благодаря MCM комплексу - который обладает геликазной активностью - открывают хроматин и делают свободным доступ репликационной кухне к ДНК. Как только начало репликации запущено комплекс pre-RC отсоединяется и не м. образоваться снова до тех пор, пока клетка находится в митозе и не вступит в G1 следующего клеточного цикла.
В конечном счете ядра в G2 или не имеют фактора, необходимого для инициации репликации или содержат ингибитор, который блокирует ее. Белок, названный блокирует репликацию ДНК путем предупреждения загрузки MCM комплекса. Wohlschlegel и др. показали, что geminin взаимодействует с MCM-loader Cdt1 в клетках человека. Они установили, что geminin-зависимое ингибирование образования pre-RC м.б. преодолено избытком Cdt1, это подтверждает предположжение, что geminin имеет своей целью Cdt1 чтобы ингибировать повторную репликацию ДНК во время одного клеточного цикла.
Tada и др. установили, что geminin блокирует лицензирующую способность одной из фракций, называемой RLF-B. Очистка RLF-B выявила, что активным инградиентом является Cdt1. Авт. подтвердили, что geminin и RLF-B взаимодействуют и противодействуют один другому. Наконец, они установили, что присутствие geminin во время метафазы достаточно чтобы полностью блокировать начало сборки.
Geminin, т.обр, лицензирует подавление репликации ДНК - по крайней мере временно. Действует ли он только через Cdt1 и прекрывается ли его функция др. регуляторными механизмами предстоит выяснить.
|