PtdIns(3)P в Эндосомах
|
ORIGINAL RESEARCH PAPER Gillooly, D. J. et al. Localization of phosphatidylinositol 3-phosphate in yeast and mammalian cells. EMBO J. 17, 4577-4588 (2000) [ FURTHER READING Corvera, S., D'arrigo, A. & Stenmark, H. Phosphoinositides in membrane traffic. Curr. Opin. Cell Biol. 11, 460-465 (1999) | | | |
Предпринята попытка локализации в клетке phosphatidylinositol-3-phosphate (PtdIns(3)P). 
Продукты участвуют в процессах сигнальной трансдукции, организации цитоскелета и в апоптозе. PtdIns(3)P особенно интересен для переноса мембран aficionados, т.к. он регулирует транспорт вдоль эндоцитотического пути у всех изученных видов. Одна из его активностей связана с рекрутированием белков, которые содержат , в мембраны. Очевидно, что PtdIns(3)P binds FYVE domains, д. связывать PtdIns(3)P. Получен зонд(2XFYVE), состоящий из двух FYVE доменов из ,белка, который действует на эндоцитотическом пути. 2XFYVE селективно связывается с PtdIns(3)P, как in vivo так и in vitro. Зонд эффективно конкурирует с эндогенными белками за связывание PtdIns(3)P.
Продукты участвуют в процессах сигнальной трансдукции, организации цитоскелета и в апоптозе. PtdIns(3)P особенно интересен для переноса мембран aficionados, т.к. он регулирует транспорт вдоль эндоцитотического пути у всех изученных видов. Одна из его активностей связана с рекрутированием белков, которые содержат , в мембраны. Очевидно, что PtdIns(3)P binds FYVE domains, д. связывать PtdIns(3)P. Получен зонд(2XFYVE), состоящий из двух FYVE доменов из ,белка, который действует на эндоцитотическом пути. 2XFYVE селективно связывается с PtdIns(3)P, как in vivo так и in vitro. Зонд эффективно конкурирует с эндогенными белками за связывание PtdIns(3)P.
Зонд 2XFYVE использовали для локализации PtdIns(3)P в клетке. FYVE finger белок локализующийся исключительно в ранних эндосомах, где он участвует в слиянии мембран. Очевидно, что в мембранах ранних эндосом д.б. существенные количества PtdIns(3)P. На рисунке 2XFYVE (окрашен в красное) четко колокализуется с EEA1 (зеленый цвет).
Неожиданно 2XFYVE показал, что PtdIns(3)P также присутстует на внутренних мембранах мультивезикулярных поздних эндосом. Было предположено, что PtdIns(3)P-содержащие внутрипросветные пузырьки возникают в результате инвагинаций эндосомной мембраны. Это д. секвестрировать PtdIns(3)P с поверхности и удержать их от рекрутирования цитоплазматических белков, таких как EEA1, в поздние эндосомы. Однако, происхождение convoluted морфологии мультивезикулярных эндосом все еще неясно.
Этот зонд не первый маркер. y и PH домены и использовались для локализации PtdIns(4,5)P 2 и PtdIns(3,4,5)P3, соотв. Но они непригодны для электронной микроскопии.