Conditional Gene Expression
Экспрессия генов
Conditional Control Of Gene Expression In The Mouse Mark Lewandoski Nature Reviews Genetics 2, 743 -755 (2001)	Временной и пространственный контроль экспрессии генов м.б. получен бинарной трансгенной системой, в которой экспрессия генов контролируется взаимодействием эффекторного белкового продукта с трансгеном-мишенью. Таких взаимодействий м. достичь при скрещиваний линейных мышей или при добалвлении или удалении экзогенных индукторов. Рис.1. Binary transgenic systems бывают двух категорий. Одна базируется на транскрипционной трансактивации и используется для активации трансгенов в gain-of-function экспериментах. Другая базируется на сайт-специфической рекомбинации ДНК и м.б. использована для активации трансгенов или получения ткане-специфичного нокаута гена и маркеров клеточных клонов. Рис.2. Наиболее широко используются транскрипционные системы, базирующиеся на устойчивости к тетрациклину опрерона Escherichia coli. Эффекторы в таких системах распадаются на 2 категории, определяемые по тому, или происходит активация транскрипции после применения или устранения соединений тетрациклина (обычно doxycycline). Рис.3. Система, базирующаяся на Gal4, является системой трансактивации, которая не нуждается в индукторе, но транскрипционная активация Gal4 может контролироваться синтетическими стероидами, если мутантный лиганд-связывающий домен включен в Gal4 химерный трансактиватор. Рис.4. Наиболее широко используется сайт-специфическая система ДНК рекомбинации с использованием Cre recombinase из бактериофага P1. Flp recombinase из Saccharomyces cerevisiae также была приспособлена для использования у мышей. Рис.5. Путем использования gene-targeting техники для получения мышей с модифицированными эндогенными генами, которые могут действовать с помощью Cre или Flp recombinases, экспрессируемых под контролем ткане-специфичных промоторов, то сайт-специфическая рекомбинация м.б. использована для инактивации эндогенных генов пространственно контролируемым способом. Приложение.1. Cre/Flp активность может также контролироваться во времени путем высвобождения cre/FLP-кодируемых трансгенов в випрусных векторах при применении экзогенных стероидов у мышей, которые несут химерный трансген, состоящий из cre гена, слитого с мутантным лиганд-связывающим доменом или путем использования транскрипционной трансактивации для контроля экспрессии cre/FLP. Необратимость сайт-специфической рекомбинации делает эту технику уникально пригодной для анализа новго типа, при котором используется временная ткане-специфическая экспрессиия cre/FLP чтобы активировать на постоянной основе репортерный ген-мишень для изучения клеточных клонов.

Временной и пространственный контроль экспрессии генов м.б. получен бинарной трансгенной системой, в которой экспрессия генов контролируется взаимодействием эффекторного белкового продукта с трансгеном-мишенью. Таких взаимодействий м. достичь при скрещиваний линейных мышей или при добалвлении или удалении экзогенных индукторов.
Рис.1.

Binary transgenic systems бывают двух категорий. Одна базируется на транскрипционной трансактивации и используется для активации трансгенов в gain-of-function экспериментах. Другая базируется на сайт-специфической рекомбинации ДНК и м.б. использована для активации трансгенов или получения ткане-специфичного нокаута гена и маркеров клеточных клонов.
Рис.2.

Наиболее широко используются транскрипционные системы, базирующиеся на устойчивости к тетрациклину опрерона Escherichia coli. Эффекторы в таких системах распадаются на 2 категории, определяемые по тому, или происходит активация транскрипции после применения или устранения соединений тетрациклина (обычно doxycycline).
Рис.3.

Система, базирующаяся на Gal4, является системой трансактивации, которая не нуждается в индукторе, но транскрипционная активация Gal4 может контролироваться синтетическими стероидами, если мутантный лиганд-связывающий домен включен в Gal4 химерный трансактиватор.
Рис.4.

Наиболее широко используется сайт-специфическая система ДНК рекомбинации с использованием Cre recombinase из бактериофага P1. Flp recombinase из Saccharomyces cerevisiae также была приспособлена для использования у мышей.
Рис.5.

Путем использования gene-targeting техники для получения мышей с модифицированными эндогенными генами, которые могут действовать с помощью Cre или Flp recombinases, экспрессируемых под контролем ткане-специфичных промоторов, то сайт-специфическая рекомбинация м.б. использована для инактивации эндогенных генов пространственно контролируемым способом.
Приложение.1.

Cre/Flp активность может также контролироваться во времени путем высвобождения cre/FLP-кодируемых трансгенов в випрусных векторах при применении экзогенных стероидов у мышей, которые несут химерный трансген, состоящий из cre гена, слитого с мутантным лиганд-связывающим доменом или путем использования транскрипционной трансактивации для контроля экспрессии cre/FLP.

Необратимость сайт-специфической рекомбинации делает эту технику уникально пригодной для анализа новго типа, при котором используется временная ткане-специфическая экспрессиия cre/FLP чтобы активировать на постоянной основе репортерный ген-мишень для изучения клеточных клонов.

Экспрессия генов