• Introduction
• Conservation of asymmetric expression patterns in lateral plate mesoderm
• Downstream of Nodal: Pitx2 and the execution of left–right morphogenesis
• Upstream of Nodal: left–right coordinator, node and midline
• Conclusions and perspectives: diverse origins that converge at left–right phylotypic stages?
• Литература
•  

FGF—fibroblast growth factor;

ft—fused toes;

inv—inversion of embryonic turning;

iv—inversus viscerum;

LRC—left–right coordinator;

LRD—left–right dynein;

Shh—Sonic hedgehog;

TGF-β—transforming growth factor-β.

   Дорсо-вентральная и передне-задняя оси, а следовательно, и билатеральная симметрия выявляются во время гаструляции. Морфологически обнаружимая асимметрия обнаруживается в позднем эмбриогенезе после образования петли сердечной трубки и киши [1] [2].

   Образование кародиальной петли высоко законсервировано у позвоночных [3]. Обнаружены асимметрично экспрессирующиеся гены у эмбрионов кур [4], более 30 мутантных генов, затрагивающих лево-правостороннее развитие, открыто у позвоновных (reviewed in [5•]). Результаты пересадок ткани указывают на то, что лево-правосторонняя ориентация специфицируется задолго до образования петель. Ключевые гены, которые функционируют позже, такие как pitx2 и cSNR1, являются транскрипционными факторами, экспрессирующимися в left–right органных клонах.

Conservation of asymmetric expression patterns in lateral plate mesoderm

  Nodal, член семейства TGF-β межклеточных сигнальных молекул, экспрессируется в левой латеральной пластинке мезодермы кур [4], мышей [6] [7], лягушек [7] [8] и рыбок данио [9•] [10•]. Большая часть мезодермы латеральной пластинки, в которой экспрессируется nodal, вносит вклад в билатеральрно симметричные структуры, однако соседняя мезодерма дает асимметричные структуры. Паттерны экспрессии nodal нарушаются у laterality mutants мышей, таких как iv [7], inv [6] [7], ft [11] и no turning [12]. IV кодирует left–right dynein (LRD) [13], а INV кодирует inversin, внутриклеточный белок с Ank/Swi6 повторами [14•] [15•]. кроме того, экспрессия nodal нарушается при действии на ранних эмбрионов факторов, нарушающих laterality, таких как нарушение экспрессии Sonic hedgehog (Shh), activin или FGF8 у кур [4] [16••] [17], экспрессии Vg1 или семейства доминантно негативных рецепторов  TGF- β у Xenopus [18] [19••], экстирпация клеток средней линии [8] или нарушения щелевых соеднинений [20••]. анализ эктопической экспрессии nodal на правой стороне у кур  [21] или лягушек [22] выявил стохастичность ориентации сердца. т.о., nodal скорее всего выступает как медиатор между  ранними сигналами и спецификацией  left–right информации в зачатках сердца и др. органов.

   Lefty2, другой член семейства TGF-β , также экспрессируется в левой латеральной пластинке мезодермы мыши  [23] [24]. как и в случае nodal, паттерн экспрессии  Lefty2 нарушен у laterality мутантов iv [23], inv [23], ft [11], nt [12], lefty1 [25••] and KIF3B [26••]. семейство Lefty является важным компонентом  left–right пути [25••]  [27•] [28•]. 

   Pitx2, член семейства  bicoid гомеобокс-содержащих транскрипционных факторов отвечает за синдром Reiger  [29] и экспрессируется билатерально в цефалической мезодерме и ткани гипофиза. Pitx2 экспрессируется на левой стороне  кардиальной трубки и кишки у кур  [30•] [31••] [32••] [33••] [34•] [35••], мышей [[25••], [32••] [33••] [34•]], frog [33••] [35••], и рыбок данио [28•] [35••]. асимметричная экспрессия  pitx2 персистирует в зачатках органов после временной асимметричной экспрессии  nodal .

   две линии доказательств указывают на то, что  pitx2 является нижестоящим компонентом на  left–right signaling пути. во-первых, паттерн экспрессии pitx2 нарушается у  laterality мутантных мышей, коррелируя с нарушением ориентации органа. Гомозиготные  iv/iv эмбрионы имеют стохастическую ориентацию органов и паттерн экспрессии (билатеральный, левый, правый или отсутствие экспрессии)  pitx2 [32••] [33••] [35••]. Передний домен экспрессии  pitx2 является билатеральным  у мутантов  lefty1, которые имеют торакальный левый изомеризм [25••]. У inv/inv эмбрионов  left–right ориентация органов инвертирована (зеркальна по отношению к норме) и pitx2 экспрессируется на правой, а не на левой стороне [33••]. Во-вторых, паттерн экспрессии pitx2 у кур или  Xenopus нарушается эктопической экспрессией left–right генов (reviewed in [5•]). у кур, эктопическая экспрессия  Shh справа индуцирует билатеральную экспрессию  pitx2  [30•] [31••] [32••] [33••]. Shh-блокирующие антитела слева уменьшают слева нормальную экспрессию left-sided  nodal [16••] и pitx2 [31••]. эктопическая экспрессия  nodal справа индуцирует  pitx2 на правой стороне у эмбрионов кур  [31••] [32••] [33••] или лягушек [35••]. следовательно, nodal стоит выше pitx2 , а  Shh , по крайней мере у кур, выше обоих. 

   эктопическая экспрессия  pitx2 у кур [31••] [33••] или лягушек [35••] нарушает left–right развитие и оказывает дополнительные эффекты. эктопическая экспрессия  pitx2 справа не индуцирует  nodal и не нарушает экспрессии cSNR1 [31••], который обычно экспрессируется в правой латеральной пластинке мезодермы  [36]. эктопическая экспрессия  pitx2 у кур увеличивает частоту кардиального изомеризма [31••] [33••].  Logan et al. [31••] предприняли попытку одновременно элиминировать Shh–Nodal–Pitx2 путь слева с помощью   Shh-блокирующих антител и активровать   pitx2 справа с помощью инфекции  pitx2-экспрессирующим вирусом. это устраняло кардиальный изомеризм и давало left–right инверсию у 30% эмбрионов.

    таким образом, pitx2 left–right асимметричная экспрессия  высоко законсервирована у позвоночных и  pitx2 находится ниже nodal. должна быть батарея генов, которые регулируются  с помощью  pitx2 и ко-факторов во время left–right морфогенеза. 

Upstream of Nodal: left–right coordinator, node and midline

   три отдельных сигнальных центра должны обеспечивать на паттерн асимметричной экспрессии nodal: клетки латеральнее узла, называемые left–right coordinator (LRC); клетки узла, посредством асимметричной экспрессии генов и/или  monocilia activity; и клетки средней линии. экспериментны на эмбрионах лягушек подтвердили, что асимметричный процессинг белка  члена семейства TGF-β , Vg1, на левой латеральной стороне эмбрионов лягушки иницирует лево-правостороннюю ось [19••]. эктопическая экспрессия Vg1 после процессинга на правой стороне инвертирует лево-правостороннюю ось, включая экспрессию nodal  [19••]. соответственно, экспрессия доминантно-негативных рецепторов  или лигандов, которые взаимодействуют с Vg1 signaling на левой стороне эмбриона ведет к стохастическому left–right развитию [19••]. хирургическая ротация узелка у ранних эмбрионов кур  указывает на то, что возникновение ассиметричной экспрессии генов  в узелке зависит от сигналов, возникающих вне узелка [16••], вообще-то латеральные клетки сравнимы с  LRC лягушек. осложняется еще тем, что асимметричная экспрессия в узелке отсутствует у  non-avian эмбрионов.

   Клетки узелка имеют специализированные  monocilia [26••] [37] [38] , которые дефектны у мутантов по kinesin KIF3B [26••], kinesin KIF3A [39•] or hepatocyte nuclear factor/forkhead homologue 4 [40•]. LRD также экспрессируется в клетках узелка [13]. соответственно, каждый из этих мутантов имеет laterality дефекты. Движения узелковых моноцилий (monocilia) могут управлять асимметричным распределением внеклеточных частиц, они дефектны у  KIF3B мутантов [26••] (reviewed in [41]). Однако вряд ли асимметричные движения monocilia формируют барьеры  между двумя сторонами узелка или окружающей латеральной тканью, препятсвуя  дисперсии информации (Fig. 1). Клетки, которые мигрируют через узелок  во время гаструляции образуют срединную линию эмбриона, хорду, hypochord и вентральную донную пластинку нервной трубки. Средняя линия является существенной для left–right развития или путем формирования барьера или путем передачи сигналов  латеральным тканям [5•] [42] [43].

Figure 1 Left–right pathway. Left–Right Coordinator (LRC) и узелок участвуют в инициации  left–right развития. У мышей, моноцилии узелка движут внеклеточные частицы влево. Движения моноцилий обеспечивают перераспределние сигнальных молекул , которые эксспресируются симметрично в латеральной ткани (стрелка влево), или создают барьер  (bar signs)для поддержания различий между двумя сторонами узелка, которые инициируются в латеральной ткани (LRC). Некоторые гены экспрессируются асимметрично внутри узелка кур. Эти ранние события обеспечивают асимметричную экспрессию nodal и lefty2 слева (у кур) cSnR1 справа. Поддержание асимметрии в латеральной пластинке мезодермы зависит от эмбриональной срединной линии  [5•].

 

Conclusions and perspectives: diverse origins that converge at left–right phylotypic stages?

  Модель с привлечением  LRC, узелка и средней линии не является, по-видимому, исключительной (Fig. 1). Столь же вероятно, что разные группы позвоночных используют  разные механизмы  инициации  left–right оси и каждый механизм конвергирует с асимметричным распределением nodal, lefty и pitx2 (Fig. 2).

Figure 2 Model: the left–right (L–R) phylotypic stages. The Left–Right Coordinator (LRC), gap junction communication (GJ), node monocilia movement and asymmetric gene expression in the node have each been implicated in the initiation of left–right development and the establishment of nodal expression on the left side of the embryo. The mechanisms that initiate left–right axis formation might have diverged in an individual taxon; however, each passes through a constrictive phase of highly conserved nodal expression patterns, during the left–right phylotypic stages, analogous to the phylotypic 'developmental hourglass' stages indicative of the zootype along the anterior–posterior axis (reviewed in [45]). Although the pathway to left–right morphogenesis can be perturbed late in development, the initiation of the left–right axis occurs early, either before or coincident with the formation of the node at the beginning of gastrulation, and is specified in lateral tissues during early neurula stages. It is striking that the proposed left–right phylotypic stages are coincident with the phylotypic stages of Hox gene patterning along the anterior–posterior axis. Each individual organ primordium derives its left–right information from the phylotypic stages, which subsequently regulates unique aspects of organ morphogenesis.

 

   Я предполагаю, что имеются   'left–right zootype' , определяемые с помощью законсервированного  паттерна  left–right экспрессии генов  (Fig. 2). Такой 'left–right zootype' в чем-то анологичен  anterior–posterior zootype, предложенному   Slack et al. [44], который базируется на паттерне законсервированной экспрессии  HOX генов  (reviewed in [45]); однако,  left–right zootype м.б. ограничен хордовыми.

   В модели left–right zootype стадии высоко законсервированной nodal (и вообще-то lefty2 и pitx2) экспрессии в левых латеральных тканях отражают спецификацию лево-правосторонней оси и м.б. определены как  'left–right phylotypic stages' для индивидуального таксона  (Fig. 2). Это указывает на то, что по крайней мере одна чать пути вниз от  nodal, и вообще кардиальный органогенез, высоко чувствительны к селективному давлению , дающему в результате асимметричную экспрессию nodal. Ступени на пути к верхним  left–right phylotypic stages должны быть способными к дивергенции. Позднее в ходе развития, после left–right phylotypic stages, генетические пути, которые  регулируют морфогенез left–right асимметрии различных органов , таких как сердце, кишка и головной мозг  могут дивергировать  и даже теряться для некоторых структур в разных таксонах. 

литература 

1. Danos MC, Yost HJ:
   Linkage of cardiac left-right asymmetry and dorsal-anterior development in Xenopus.
   Development 1995, 121: 1467–1474. 
   
2. Yost HJ:
   Vertebrate left-right development.
   Cell 1995, 82: 689–692. 
3. Burggren WW:
   Cardiac design in lower vertebrates: what can phylogeny reveal about ontogeny?
   Experientia 1988, 44: 919–930.
4. Levin M, Johnson RL, Stern CD, Kuehn M, Tabin C:
   A molecular pathway determining left-right asymmetry in chick embryogenesis.
   Cell 1995, 82: 803–814.
5. • Ramsdell AF, Yost HJ:
   Molecular mechanisms of vertebrate left-right development.
   Trends Genet 1998, 14: 459–465.
6. Collignon J, Varlet I, Robertson EJ:
   Relationship between asymmetric nodal expression and the direction of embryonic turning.
   Nature 1996, 381: 155–158.
7. Lowe LA, Supp DM, Sampath K, Yokoyama T, Wright CVE, Potter SS, Overbeek P, Kuehn MR:
   Conserved left-right asymmetry of nodal expression and alterations in murine situs inversus.
   Nature 1996, 381: 158–161.
8. Lohr JL, Danos MC, Yost HJ:
   Left-right asymmetry of a nodal-related gene is regulated by dorsoanterior midline structures during Xenopus development.
   Development 1997, 124: 1465–1472.
9. • Sampath K, Rubinstein AL, Cheng AM, Liang JO, Fekany K, Solnica-Krezel L, Korzh V, Halpern ME, Wright CV:
   Induction of the zebrafish ventral brain and floorplate requires cyclops/nodal signalling.
   Nature 1998, 395: 185–189.
10. • Rebagliati MR, Toyama R, Fricke C, Haffter P, Dawid IB:
    Zebrafish nodal-related genes are implicated in axial patterning and establishing left-right asymmetry.
    Dev Biol 1998, 199: 261–272.This paper, along with [9•], demonstrates that the cyclops gene in zebrafish encodes a member of the nodal family and that asymmetric nodal expression is conserved in zebrafish. This asymmetric expression is altered in midline mutants no tail and floating head, previously shown to have laterality defects [5•]. These results strengthen the conclusion that nodal has a conserved and pivotal role in vertebrate left–right development.
    
11. Heymer J, Kuehn M, Ruther U:
    The expression pattern of nodal and lefty in the mouse mutant Ft suggests a function in the establishment of handedness.
    Mech Dev 1997, 66: 5–11.
12. Melloy PG, Ewart JL, Cohen MF, Desmond ME, Kuehn MR, Lo CW:
    No turning, a mouse mutation causing left-right and axial patterning defects.
    Dev Biol 1998, 193: 77–89.
13. Supp DM, Witte DP, Potter SS, Brueckner M:
    Mutation of an axonemal dynein affects left-right asymmetry in inversus viscerum mice.
    Nature 1997, 389: 963–966. 
14. • Mochizuki T, Saijoh Y, Tsuchiya K, Shirayoshi Y, Takai S, Taya C, Yonekawa H, Yamada K, Nihei H, Nakatsuji N et al.:
    Cloning of inv, a gene that controls left/right asymmetry and kidney development.
    Nature 1998, 395: 177–181.
15. • Morgan D, Turnpenny L, Goodship J, Dai W, Majumder K, Matthews L, Gardner A, Schuste RG, Vien L, Harrison W et al.:
    Inversin, a novel gene in the vertebrate left-right axis pathway, is partially deleted in the inv mouse.
    Nat Genet 1988, 20: 149–156.This paper, along with[14•], identifies the inv gene product as inversin, a cytoplasmic protein with Ank/Swi6 repeats and nuclear localization signals. The inv gene is of great interest because the inv/inv mouse phenotype is nearly complete inversion of the left–right axis, whereas most other laterality mutants have stochastic orientations of organs. This has lead to the assumption that the inv gene functions early in the left–right pathway.
    
16. •• Pagan-Westphal SM, Tabin CJ:
    The transfer of left-right positional information during chick embryogenesis.
    Cell 1998, 93: 25–35.Evidence from rotation of the chick node indicates that signals from outside the node, perhaps the left–right coordinator proposed in [19••], establish asymmetric gene expression patterns within it. In addition, the role of the midline in establishment of nodal expression in the lateral plate is shown to be dependent on intermediary tissues and signals.
    
17. Boettger T, Wittler L, Kessel M:
    FGF8 functions in the specification of the right body side of the chick.
    Curr Biol 1999, 9: 277–280. 
18. Hyatt BA, Lohr JL, Yost HJ:
    Initiation of vertebrate left-right axis formation by maternal vg1.
    Nature 1996, 384: 62–65.
19. •• Hyatt BA, Yost HJ:
    The left-right coordinator: the role of Vg1 in organizing left-right axis formation.
    Cell 1998, 93: 37–46.Ectopic expression of processed Vg1 protein on the right side of Xenopus embryos inverts the left–right axis, with a phenotype comparable to mutants in the mouse inversin gene described in [14•] [15•]. This paper proposes a model by which left–right development is coordinated with midline development and anterior–posterior development.
    
20. •• Levin M, Mercola M:
    Gap junctions are involved in the early generation of left-right asymmetry.
    Dev Biol 1998, 203: 90–105.This paper demonstrates an early role for gap-junction communication in left–right development in Xenopus and proposes a model by which asymmetric movement through gap junctions could establish left–right asymmetry in conjunction with dorsal–ventral axis formation.
    
21. Levin M, Pagan S, Roberts DJ, Cooke J, Kuehn MR, Tabin CJ:
    Left/right patterning signals and the independent regulation of different aspects of situs in the chick embryo.
    Dev Biol 1997, 189: 57–67.
22. Sampath K, Cheng AM, Frisch A, Wright CV:
    Functional differences among Xenopus nodal-related genes in left-right axis determination.
    Development 1997, 124: 3293–3302.
23. Meno C, Saijoh Y, Fujii H, Ikeda M, Yokoyama T, Yokoyama M, Toyoda Y, Hamada H:
    Left-right asymmetric expression of the TGF-β family member lefty in mouse embryos.
    Nature 1996, 381: 151–155. 
24. Meno C, Ito Y, Saijoh Y, Matsuda Y, Tashiro K, Kuhara S, Hamada H:
    Two closely-related left-right asymmetrically expressed genes, lefty-1 and lefty-2: their distinct expression domains, chromosomal linkage and direct neuralizing activity in Xenopus embryos.
    Genes Cells 1997, 2: 513–524.
25. •• Meno C, Shimono A, Saijoh Y, Yashiro K, Mochida K, Ohishi S, Noji S, Kondoh H, Hamada H:
    lefty-1 is required for left-right determination as a regulator of lefty-2 and nodal.
    Cell 1998, 94: 287–297.Knockout of the lefty-1 gene in mice results in bilateral expression of nodal, lefty2 and pitx2 and in thoracic left isomerism. These effects are probably as a result of loss of the function of the midline in left–right development. The observation that initially asymmetric expression patterns become symmetrical supports proposals that the midline serves as a barrier that prevents signals from crossing between the two sides of the embryo.
    
26. •• Nonaka S, Tanaka Y, Okada Y, Takeda S, Harada A, Kanai Y, Kido M, Hirokawa N:
    Randomization of left-right asymmetry due to loss of nodal cilia generating leftward flow of extraembryonic fluid in mice lacking KIF3B motor protein.
    Cell 1998, 95: 829–837.This paper demonstrates asymmetric movement by node monocilia (see the website at http://www.cell.com/cgi/content/full/95/6/829/DC1) and loss of monocila function in KIF3B mutants, which correlates with left–right developmental defects and other pleiotropic effects.
    
27. • Thisse C, Thisse B:
    Antivin, a novel and divergent member of the TGFbeta superfamily, negatively regulates mesoderm induction.
    Development 1999, 126: 229–240.Identification of a lefty gene in zebrafish indicates, along with [28•], that lefty genes and some of their asymmetric expression patterns are conserved.
    
28. • Bisgrove B, Essner J, Yost HJ:
    Regulation of midline development by antagonism of lefty and nodal signaling.
    Development 1999, 126: 3253–3262. Identification of two lefty genes in zebrafish indicates, along with [27•], that lefty genes and some of their asymmetric expression patterns are conserved. In addition, ectopic expression of zebrafish lefty suppresses zebrafish pitx2 expression, similar to what is described in chick embryos with ectopic mouse lefty [34•].
    
29. Semina EV, Reiter R, Leysens NJ, Alward WL, Small KW, Datson NA, Siegel-Bartelt J, Bierke-Nelson D, Bitoun P, Zabel BU et al.:
    Cloning and characterization of a novel bicoid-related homeobox transcription factor gene, RIEG, involved in Rieger syndrome.
    Nat Genet 1996, 14: 392–399.
30. • St Amand TR, Ra J, Zhang Y, Hu Y, Baber SI, Qiu M, Chen Y:
    Cloning and expression pattern of chicken Pitx2: a new component in the SHH signaling pathway controlling embryonic heart looping.
    Biochem Biophys Res Commun 1998, 247: 100–105. 
    Demonstration that pitx2 is expressed asymmetrically in chick embryos and that pitx2 expression can be induced by shh.
    
31. •• Logan M, Pagan-Westphal SM, Smith DM, Paganessi L, Tabin CJ:
    The transcription factor Pitx2 mediates situs-specific morphogenesis in response to left-right asymmetric signals.
    Cell 1998, 94: 307–317.Elegant demonstrations in chick that pitx2 is downstream of sonic and nodal and that altered pitx2 expression can alter left–right organ morphogenesis.
    
32. •• Piedra ME, Icardo JM, Albajar M, Rodriguez-Rey JC, Ros MA:
    Pitx2 participates in the late phase of the pathway controlling left-right asymmetry.
    Cell 1998, 94: 319–324.This paper presents data demonstrating that pitx2 is downstream of iv in mouse embryos and can be altered by ectopic nodal, shh or activin in chick embryos. These observations support the view that pitx2 acts late in the left–right signaling pathway and is proximal to the specification of laterality in organ primordia.
    
33. •• Ryan AK, Blumberg B, Rodriguez-Esteban C, Yonei-Tamura S, Tamura K, Tsukui T, de la Pena J, Sabbagh W, Greenwald J, Choe S et al.:
    Pitx2 determines left-right asymmetry of internal organs in vertebrates.
    Nature 1998, 394: 545–551This paper presents data demonstrating that pitx2 is downstream of iv and inv in mouse embryos and can be altered by ectopic nodal or shh, or dominant negative Activin receptors in chick embryos, or by ectopic nodal in frog embryos. In addition, ectopic pitx2 expression in chick or frog embryos alters anterior–posterior and left–right development.
    
34. • Yoshioka H, Meno C, Koshiba K, Sugihara M, Itoh H, Ishimaru Y, Inoue T, Ohuchi H, Semina EV, Murray JC et al.:
    Pitx2, a bicoid-type homeobox gene, is involved in a lefty-signaling pathway in determination of left-right asymmetry.
    Cell 1998, 94: 299–305. 
    Pitx2 is asymmetrically expressed in mouse and chick. Ectopic expression of mouse lefty in chick embryo suppresses pitx2. Data not shown suggests that pitx2 is downstream of IV in mice and can be induced by Shh in chick.
    
35. •• Campione M, Steinbeisser H, Schweickert A, Deissler K, van Bebber F, Lowe LA, Nowotschin S, Viebahn C, Haffter P, Kuehn MR, Blum M:
    The homeobox gene Pitx2: mediator of asymmetric left-right signaling in vertebrate heart and gut looping.
    Development 1999, 126: 1225–1234.Pitx2 is asymmetrically expressed in chick, Xenopus and zebrafish embryos. In Xenopus embryos, ectopic activin or nodal can induce pitx2, and ectopic pitx2 can alter left–right development.
    
36. Isaac A, Sargent MG, Cooke J:
    Control of vertebrate left-right asymmetry by a snail-related zinc finger gene.
    Science 1997, 275: 1301–1304.
37. Sulik K, Dehart DB, Iangaki T, Carson JL, Vrablic T, Gesteland K, Schoenwolf GC:
    Morphogenesis of the murine node and notochordal plate.
    Dev Dyn 1994, 201: 260–278. 
38. Bellomo D, Lander A, Harragan I, Brown NA:
    Cell proliferation in mammalian gastrulation: the ventral node and notochord are relatively quiescent.
    Dev Dyn 1996, 205: 471–485. 
39. • Marszalek JR, Ruiz-Lozano P, Roberts E, Chien KR, Goldstein LS:
    Situs inversus and embryonic ciliary morphogenesis defects in mouse mutants lacking the KIF3A subunit of kinesin-II.
    Proc Natl Acad Sci USA 1999, 96: 5043–5048.
40. • Chen J, Knowles HJ, Hebert JL, Hackett BP:
    Mutation of the mouse hepatocyte nuclear factor/forkhead homologue 4 gene results in an absence of cilia and random left-right asymmetry.
    J Clin Invest 1998, 102: 1077–1082.This paper, along with [26••] 39•], shows correlation of a loss of node monocilia structure and loss of normal left–right development. Mutants of Hepatocyte Nuclear Factor/Forkhead homologue 4 also lack cilia in respiratory epithelium, oviduct and choroid plexus as well as sperm flagella, analogous to ciliary and laterality defects in Kartagener's syndrome in humans.
    
41. Vogan KJ, Tabin CJ:
    A new spin on handed asymmetry.
    Nature 1999, 397: 295,297–298. 
42. Lohr JL, Danos MC, Groth TW, Yost HJ:
    Maintenance of asymmetric nodal expression in Xenopus laevis.
    Dev Genet 1998, 23: 194–202.
43. Levin M, Mercola M:
    Evolutionary conservation of mechanisms upstream of asymmetric Nodal expression: reconciling chick and Xenopus.
    Dev Genet 1998, 23: 185–193. 
    
44. Slack JM, Holland PW, Graham CF:
    The zootype and the phylotypic stage.
    Nature 1993, 361: 490–492. 
45. Richardson MK, Allen SP, Wright GM, Raynaud A, Hanken J:
    Sornite number and vertebrate evolution.
    Development 1998, 125: 151–160.