ПОЛИАДЕНИЛИРОВАНИЕ
Трансляция мРНК cyclin B1 регулируется цитоплазматическим полиаденилированием. Этот процесс является критическим для для активации различных матерински наследуемых мРНК во время раннего развития многих животных.
|
ORIGINAL RESEARCH PAPER Groisman, I. et al. CPEB, maskin, and cyclin B1 mRNA at the mitotic apparatus: implications for local translational control of cell division. Cell 103, 435-447 (2000) | | | FURTHER READING Richter, J. D. Cytoplasmic polyadenylation in development and beyond. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 63, 446-456 (1999) | | | |
В ооцитах Xenopus в ответ на стимуляциию прогестероном poly(A) хвосты определенных мРНК (кодирующих, среди прочих, разные циклины) удлинняются.
Центральным игроком в полиаденидировании является cytoplasmic polyadenylation element-binding protein ( ), который рекрутируется фактором, который способствует взаимодействию между poly(A) polymerase и концом mRNA. Полиаденилирование в свою очередь запускает трансляцию, и ключевым в этом сдвиге является - белок, который, по-видимому, регулирует доступность инициирующего трансляцию фактора eIF4E для второго фактора eIF4G, который помещает 40S рибосомальную субъединицу на 5' конец мРНК.
Известно, что некоторые мРНК концентрируются в определенных областях ооцита Xenopus. Имуноокрашивание ооцитов антителами против CPEB и maskin показало, что оба белка концентрируются в кортексе анимального полюса во время поздней стадии развития ооцита. Неожиданным оказалось то, что у ранних эмбрионов CPEB и maskin, по-видимому, локализуются в структурах, напоминающих митотическое веретено.
| Xenopus embryo blastomere immunostained for CPEB and tubulin
| Xenopus embryo blastomere immunostained for CPEB and tubulin В метафазе был выявлен градиент CPEB и maskin вдоль оси веретена с пиком в области вокруг центросом. Было установлено, что эти белки ассоциируют непосредственно с микротрубочками in vitro.
Итак, CPEB и maskin локализуются в веретене и центромерах. Используя гибридизацию in situ было установлено, что мРНК cyclin B1 также локализуется на анимальном полюсе ооцитов Xenopus oocytes и более специфично в веретене. Эта локализация мРНК зависит от CPEB, т.к. синтез cyclin оказывается блокированным у одноклеточных эмбрионов после инъекции антител против CPEB. Это воздействие обусловливает в 3-5 раз более медленное деление при этом обнаруживаются дефекты веретена, такие как множественные центросомы, отсоединение центросом от веретена или бифуркации веретена.
Таким образом, CPEB и maskin регулируют трансляцию cyclin B1, процесс важный не только для интеграции митотического аппарата, но и клеточного деления в целом. Local delivery, it seems, really is the safest option.