Чтобы выяснить транскрипционную регуляцию, лежащую в основе спецификации отических плакод, изучали расположенный ниже Sox3 энхансер Otic1 у эмбрионов кур, активность которого ограничена и распределяется по всей отической плакоде. Последовательность энхансера в 181 пн Otic1 была вычленена в виде минимальной активирующей последовательности в 68 пн, которая обладала энхансерной активностью димера в отической плакоде и цефалическом нервном гребне и в дальнейшем была уменьшена до стержневой последовательности в 25 пн Otic1, которая также обнаруживала активность октамерного энхансера в тех же самых регионах. Стержневой октамер Otic1 был активирован с помощью комбинированного действия Sall4 и транскрипционных факторов SoxE (TFs) Sox8 или Sox9. Соединение Sall4, Sox8 и Sox9 с Otic1 последовательностью в тканях эмбриона было подтверждено с помощью ChIP-qPCR анализа. Прилегающая к стержневой последовательности 3' боковая последовательность Otic1 усиливала свою энхансерную активность, тогда как включение последовательности CAGGTG непосредственно в 3' конец последовательности в 68 пн репрессировала его энхансерную активность вне отической плакоды. CAGGTG последовательность, скорее всего, служит в качестве места связывания репрессорных транскрипционных факторов δEF1 (Zeb1), Sip1 (Zeb2) и Snail2, каждый их которых экспрессируется в цефалической части нервного гребня, но не в отической плакоде. Следовательно, активация, зависящая от комбинации Sall4-Sox8, и зависимая от CAGGTG последовательности репрессия предопределяют развитие отической плакоды. Хотя последовательность Otic1 не законсервирована у млекопитающих или рыб, механизм активации за счет Otic1 действует в эмбриональных стволовых клетках мышей и у временных трансгенных эмбрионов рыбок данио.