Microtubule actin crosslinking factor 1 (MACF1) является крупным spectraplakin белком, выполняющим критическую роль в регуляции цитоскелетной динамики, клеточной миграции и дифференцировке. Однако, его роль и механизм действия в кости остается неясным. Изучали оптимальные условия для эффективной трансфекции крупной плазмиды PEGFP-C1A-ACF7 (~21 kbp), содержащей полной длины кДНК MACF1 человека, а также потенциальную роль MACF1 в формировании кости. Для усиления экспрессии MACF1 плазмида трансфицировалась в остеогенные клетки с помощью электропортации in vitro и в череп мыши с помощью наночастиц. Затем анализировали эффективность трансфекции , экспрессию остеогенных маркеров, толщину свода черепа и образование кости. Безусловно, избыточная экспрессия MACF1 вызывала резкие изменения в экспрессии остеогенных генов, в активности щелочной фосфатазы и минерализации матрикса in vitro. Толщина свода черепа мыши, скорость отложения минерала и экспрессия остеогенного маркерного белка достоверно увеличивались при локальной трансфекции. Кроме того, избыточная экспрессия MACF1 способствовала экспрессии β-catenin и передаче сигналов. Итак, избыточная экспрессия MACF1 с помощью трансфекции крупных плазмид, содержащих полной длины кДНК MACF1, способствует дифференцировке остеобластов и формированию кости посредством передачи сигналов β-catenin. Полученные данные предоставляют пригодные экспериментальные параметры для трансфекции крупных плазмид и новую стратегию, способствующую формированию кости и для терапии нарушений кости.