Растет количество in vitro печеночных моделей для изучения генетики человека, биологии печени, моделирования болезней и разработки лекарств и в пределах от 2D гепатоцитов до 3D многоклеточны тканей, проиходящих из стволовых клеток человека. Однако, модели, базирующиеся на стволовых клетках в целом страдают зависимостью от изменчивости партии, клона и донора, что мешает их широкому использованию в биомедицинских исследованиях. Для преодоления этих проблем мы описываем здесь воспроизводимый протокол получения органоидов печни человека в течение 20-25 дней из плюрипотентных стволовых клеток (PSCs). Эти органоиды поляризованы внутри своих просветов, чтобы формировать структуры канальцев и представлены главными печеночными эпителиальными клетками, при этом совместно дифференцируются звездчато-образные и печеночные макрофаги-подобные клетки, способные моделировать печеночные воспалительные процессы in vitro. Эти мультиклональные печеночные органоиды экспрессируют гены гепатоцитов, секретируют альбумин и исполняют жизненно важные метаболические функциии. Этот протокол использует PSC, происходящие из 3D печеных органоидов человека в качестве возобновляемого, воспроизводимого и персонализованного источника клеток, облегчая тем самым моделирование болезни и механистические исследования, нацеленные на лечение в будущем неизлечимых болезней.