Последнее обновление: 01/26/2025 06:16:02 Меню и поиск на этом сайте ЗДЕСЬ Дополнительная информация ЗДЕСЬ!!
WMZ: Z191701361450 WMR: R209318204033
Без рекламы только Браузер Uran (скачать )Посещений:
BRCT Домены
Manke, I. A. et al. BRCT repeats as phosphopeptide-binding modules involved in protein targeting. Science302, 636-639 (2003) | Article | PubMed | ISI | ChemPort
Yu, X. et al. The BRCT domain is a phospho-protein binding domain. Science302, 639-642 (2003) | Article | PubMed | ISI | ChemPort
Rodriguez, M. et al. Phosphopeptide binding specificities of BRCT domains. J. Biol. Chem. 24 Oct 2003 [epub ahead of print]
Evolutionarily ancient modular BRCT domains are present in many proteins that have roles in the DNA-damage response (cell-cycle checkpoint and DNA repair). However, until now, little was known about exactly how these domains function.
В первых работах, опубликованных в Science, Yaffe и др. нашли, что два С-терминальных тандемных BRCT ((BRCT)2) домена в DNA-damage-response белках PTIP и BRCA1 связываются строго и специфически с библиотекой из pSer/pThr-Gln phosphopeptides — фосфорилированный мотив которых генерируется посредством ATM и ATR kinases, которые становятся активными в ответ на повреждения ДНК. Они также установили также опитимальные связывающие мотивы для этих доменов, которые обнаруживают строгую селекуию в отношении ароматичеких и/или алифатических остатков в положнеии +3.
Эти авт. показали также, что после повреждения ДНК имеет место специфическое ATM-зависимое взаимодействие между PTIP (BRCT)2 доменами и белком, отвечающим на повреждение ДНК, 53BP1. Домены (BRCT)2 на N-концах PTIP, 53BP1 и MDC1 (медиатор реакции на повреждение ДНК) не обнаруживают phosphopeptide discrimination, тогда как у почкующихся дрожжей Rad9 обнаруживает лишь слабое фосфопептид-зависимое связываение. Это привело Yaffe и др. к заключению, сто фук\нкуия связывания фосфопептидов не присутствует во всех (BRCT)2 доменах.
Во второй работе Chen и др. сосредоточили внимание на BRCA1 (BRCT)2 доменах и их взаимодействии с предполагаемой DEAH-helicase BACH1. И в самом деле они нашли, что BACH1–BRCA1-(BRCT)2 взаимодействие зависит от фосфорилирования BACH1 Ser990 и регулируемого клеточного цикла — BACH1 pSer990 присутствует только в S-G2-M клетках в виде BACH1–BRCA1 комплекса. Это взаимодействие является важным для активации G2-M checkpoint, который гарантирует, что нормальные клетки, поврежденные ионизирующей радиацией, будут арестованы и вступят в митоз только после завершения репарации ДНК (этот checkpoint отсутствует в BRCA1-дефицитных клетках).
Chen и др. установили также, что интактная структура (BRCT)2 доменов являются существенно, а присутствие остатка Phe в позиции +3 является основным детерминантом специфичности связывания, это согласуется с данными группы Yaffe. Кроме того было показано, что BRCT домены Fcp1 и TopBP1 связываются с фосфорилрованой RNA polymerase II и E2F1, соотв., иллюстрируя тем самым, что phosphopeptide-специфическое связывание BRCT доменов м.б. всеобщим феноменом.
Сообщение в The Journal of Biological Chemistry, Songyang и др. подтверждает результаты BRCA1 (BCRT)2 групп Chen и Yaffe. Но они установили, что (BRCT)2 домены в MDC1 не связывают специфических фосфопептидов. Но они делают это в BARD1 и DNA ligase IV, хотя сила этих взаимодействий кажется довльно слабой. Способность Rad9 (BRCT)2 доменов распознавать специфические фосфпептиды, хотя и слабая, указывает н ато, что эта функция появилась в ранней эволюции.
Ита, эти три работы начали выяснять молекулярные основы функции доменов BRCT в ответе на повреждения ДНК — они установили связь между киназами, активируемыми в ответ на повреждения ДНК и сборкой мультибелковых комплексов в ядре.
Т.к. большинство мутаций BRCA1 дает в результате укороченные белки, в которых отсутствует один или оба домена BRCT, и это желает женщин предрасположенными к возникновению рака груди и яичников, то открытие этого нового самейства phosphopeptide-связывающих доменов обладает важным терапевтическим потенциалом.