Посещений:
Nuclear Pore Complexes (NPCs)
Формирование Ядерных Пор
In higher eukaryotes, the nuclear envelope (NE) breaks down during mitosis and nuclear pore complexes (NPCs) disassemble. So, what happens after mitosis? How do nucleoporins (Nups) reassemble to form NPCs that are incorporated into the new NE? This process has remained unclear, but now, in Cell, Mattaj, Doye and colleagues report that the conserved Nup107–160 complex has a crucial role in organizing this get-together.

FURTHER READING
Vasu, S. K. & Forbes, D. J. Nuclear pores and nuclear assembly. Curr. Opin. Cell Biol. 13, 363-375 (2001) | Article |  PubMed |  ChemPort

WEB SITES
Valerie Doye's laboratory | Iain W. Mattaj's laboratory
Walther, T. C. et al. The conserved Nup107-160 complex is critical for nuclear pore complex assembly. Cell 113, 195-206 (2003) |  PubMed |  ChemPort


АВт. впервые использовали RNA interference в клетках HeLa для снижения уровней Nup107 и Nup133 — двух компонентов комплекса Nup107–160. Они установили, что такое истощение снижает уровни многочисленных Nups и уменьшает плотность NPCs в NE — эти данные указывают на роль Nup107 and Nup133, a , следовательно, Nup107–160 комплекса в сборке in NPC.
Для получения прямых доказательств подобной роли комплекса Nup107–160, Mattaj, Doye и др. использовали систему in vitro, базирующуюся на экстрактах яиц Xenopus. Прежде всего они изучили, когда комплекс Nup107–160 функционирует в повторной сборке NE, используя хроматин спермиев в качестве матрицы для повторной сборки и установили, что Nup107 и Nup133 ассоциируют с хроматином раньше по сравнению с группой FG-повторы-содержащих Nups.
Затем авт. истощали совместно Nup107 и Nup133 в этой системе in vitro и показали, что как и в mock-depleted контроле, закрытые NEs формируются на хроматиновых матрицах. Однако, в отличие от контроля они практически не обнаруживают NPCs на собранных ядрах в Nup107/133-истощенных экстактах.
Затем Mattaj, Doye и др. попытались комплементировать дефект. Они очищали Nup107–160 комплекс из экстрактов яиц Xenopus и показали, что сборка и функционирование NPC м.б. восстановлены только если комплекс добавляется к истощенным экстрактам перед образованием закрытой NE. Комплекс Nup107–160 , следовательно, необходим "...prior to NE closure for postmitotic NPC assembly into the NE".
В финальной части их исследования была использована система in vitro для выявления ступени, на которой Nup107–160 комплекс функционирует в сборке NPC. Они показали, что в отличие от mock-истощенных экстрактов группа FG-повторы-содержащих Nups не м. ассоциировать стабильно с хроматином в экстрактах co-depleted по Nup107 и Nup133. Это указывает на то, что комплекс Nup107–160 функционирует, чтобы рекрутировать эти FG-повторы-содержащие Nups в хроматин прежде, чем они соберутся в NPCs и будут вставлены в NE.
Итак, установлена критическая роль Nup107–160 комплекса в сборке постмитотических NPC. Предложена ступенчатая модель, согласно которой эта сборка инициируется на хроматине за счет раннего привлечения комплекса Nup107–160. Возникает вопрос, м. ли этот коплекс также функционировать во время сборке NPC в NPC-содержащих NEs.
Сайт создан в системе uCoz