The telomerase-associated protein p43 is involved in anchoring telomerase in the nucleus Matthias Mollenbeck, Jan Postberg, Katrin Paeschke, Michael Rossbach, Franziska Jonsson, and Hans J. Lipps JCS 2003 116: 1757-1761.
(Рис.1.) | Schematic representation of mammalian GSK-3 and GSK-3β
Теломеры реплицируются с помощью telomerase, рибонуклеопротеина который добавляет теломерные повторы к 3' концам хромосом. Биохимия этой реакции установлена, но как организованиа machinery репликации концов in vivo и какова рольассоциированных с теломеразой белков, таких как p43 остаётся неизвестной. Hans Lipps и др. изучали это у Euplote, spirotrichous цилиат, xbm макроядра содержат многочисленные теломеры (см. ). Они продемонстрировали, что telomerase и p43 образуют комплексы, которые прикрепляются к ядерному матриксу с помощью p43. Было установлено, что telomerase и p43 остаются ассоцированными с ядерным матриксом, в то время как теломерные последовательности сами по себе высвобождаются во время репликации. Используя RNAi впервые у spirotrich, авт. смогли продемонстрировать, что удавление p43 или telomerase не только удерживает белки от ассоциации с ядерным матриксом, но также продуцирует дефекты ядер, скорее всего обусловленные с помощью дефектной репликации ДНК. Они предполагают, что связывание теломеразы индуцирует структурыны изменения в p43, которые позволют закрепить комплекс p43-telomerase в ядерном матрикса, где ферментативный комплекс д. располагаться для большей функциональной эффективности.
Stepwise protein-mediated RNA folding directs assembly of telomerase ribonucleoprotein
Michael D. Stone, Mariana Mihalusova, Catherine M. O'Connor, Ramadevi Prathapam, Kathleen Collins & Xiaowei Zhuang (zhuang@chemistry.harvard.edu)
Nature 446,n7134, 458-461 (22 March 2007) | doi:10.1038/nature05600
Теломераза является существеннм клеточным ribonucleoprotein (RNP), который решает проблему конечной репликации и поддерживает стабильность хромосом путем добавления теломерной ДНК к концам линейных хромосом1, 2, 3. Генетические мутации, которые устаняют нормальную сборку теломеразы RNP, вызывают болезни у людей4. Следовательно, существует фундаментальное и медицинское значение расшифровка клеточных стратегий биогенеза теломеразы, что нуждается в новой информации о том, какие специфические взаимодействия происходят в точной последовательности на пути сборки RNP. Использовали single-molecule подход для вычленения индивидуальных ступеней сборки теломеразы. Прямое наблюдение сложного образования в реальном времени выявило две последовательнче ступени индуцируемого белком сворачивания ( folding) РНК, устанавливающие механизм иерархической сборки RNP: взаимодействие telomerase holoenzyme с белком p65 индуцирует структурную перестройку теломеразной РНК, которая в свою очередь управляет связыванием telomerase reverse transcriptase, чтобы сформировать функциональный трехчастный комплекс. Подобный процесс иерархической сборки облегчается с помощью эволюционо законсервированного структурного мотива внутри РНК. Эти результаты выявляют путь упаковки РНК во время биогенеза telomerase и выявляют механизм действия для существенного telomerase holoenzyme белка.
