Широкий диапазон angiogenic факторов не только вносит вклад в быстрое увеличение и агрессивность endothelial cells (ECs), но также и защищает ECS от апоптоза. (или Raf-1), который, как известно, является важным для выживания EC, теперь известен как основной регулятор апоптоза. В Science группа David Cheresh's сообщила, что дифференциальный регултор Raf с помощью basic fibroblast growth factor () и vascular endothelial growth factor () защищает ECs from внутренне- и внешне-вызываемого апоптоза, соотв.
На ECs воздействовали или bFGF или VEGF после индукции апоптоза с помощью стрессов(intrinsic путь) или рецепторами-опосредованных механизмов (extrinsically). bFGF оказывал более эффективную защиту против первых, тогда как VEGF предупреждал последние. Эти результаты подтверждены и in vivo для обоих факторов. И bFGF и VEGF активируют c-Raf. Группа Cheresh's использовала phosphospecific антитела против двух разных сайтов в Raf: домен активации Raf фосфорилируется (и активируется) с помощью p21-activated kinase () по серинам 338 и 339 или с помощью по тирозинам 340 и 341. bFGF индуцирует фосфорилирование в сайте PAK, в то время как VEGF более эффективно фосфорилирует сайт Src. Напротив, селективное блокирование активности PAK или Src ингибирует bFGF- или VEGF-индуцированную активность c-Raf, соотв.
Ростовым фактором обусловленная активация c-Raf активирует extracellular-signal-regulated kinase/mitogen-activated protein kinase (ERK/MAPK) посредством MAPK и ERK киназ . Авт. добавляли селективный ингибитор MEK, PD98059, к ECs, которые были обработаны или bFGF или VEGF и индуцированы к апоптозу. PD98059 влиял только на VEGF-обусловленную защиту ECs, так что bFGF-индуцированная Raf-опосредованная защита от апоптоза, по-видимому, осуществляется независимо от MEK и ERK/MAPK.
Направление c-Raf в митохондриальные мембраны, как известно, защищает клетки от апоптоза, индуцированного стрессами, независимо от MEK и ERK/MAPK. Возник вопрос, способствует ли bFGF транслокации Raf в митохондрии. После обработки bFGF или VEGF, EC-лизаты фракционировали и фракции. обогащенные цитоплазмой или митохондриями immunoblotted по c-Raf. bFGF, но не VEGF, способствовал транслокации c-Raf на митохондрии. Мутирование серинов в сайте PAK фосфорилирования приводило к c-Raf блокировани этой транслокации и bFGF-обусловленного выживания ECs в ответ на стрессы. Сходным образом,мутирование тирозинов в сайте Src фосфорилирования c-Raf предупреждало VEGF-обусловленную защиту от extrinsic апоптоза.
Итак, если pro-survival факторы м. кооперироваться, чтобы изменить порог чувствительности EC к апоптическим факторам, то это необходимо учитывать, когда предписываются лекарства против опухолей, ассоциированных ссосудами — комбинационная терапия, нацеленная на эти про-апоптические пути м.б. более эффективной.