Посещений:
X chromosome inactivation (XCI)
Инактивация Х: Eed-Enx1 комплексы
X chromosome inactivation (XCI) — silencing of one of the two female X chromosomes to ensure equal dosage of X-linked genes in XX and XY individuals — and autosomal imprinting — the differential expression of alleles depending on their parent-of-origin — were once considered to be distinct phenomena. Recent data indicate that these regulatory processes have many features in common, and two groups provide evidence in support of this link. Mager et al. show, for the first time, that the mouse Eed (embryonic ectoderm development) Polycomb group (PcG) protein is needed for autosomal imprinting, and, building on previous work that demonstrated a role for Eed in imprinted XCI, Silva et al. now show that Eed has a central role in random XCI

Mager, J. et al. Genome imprinting regulated by the mouse Polycomb group protein Eed. Nature Genet. 33, 502-507 (2003) | Article  |  PubMed |  ChemPort
Silva, J. et al. Establishment of Histone H3 methylation on the inactive X chromosome requires transient recruitment of Eed-Enx1 polycomb group complexes. Dev. Cell 4, 481-495 (2003) | PubMed | ChemPort


Накопление Xist РНК вдоль неактивной1 Х хромосомы (Xi) — первая существенная ступень к X chromosome inactivation (XCI) — она рекрутирует факторы, которые необходимы для молчания (silencing), включая PcG белки Eed и Enx1. Silva et al. использовали иммунофлюоресценцимю, чтобы показать, что в дифференцирующейся линии стволовых клеток мыши и в эмбрионах мыши эти белки формируют временные фокусы на Х хромосоме, котора д.б. инактивирована; это совпадает с экспрессией РНК Xist. Трансгенные эксперименты, в которых Xist эктопически экспрессируется в XY клетках линии и мышах, и исследования Xist мутантов показали, что Xist необходим и достаточен для формирования фокусов Eed–Enx1 на Х хромосоме.
Авт. производили мониторинг модификаций гистона H3, чтобы найти, как локализация Eed–Enx1 генерирует модификации гистонов, которые необходимы для XCI. Сильное иммунофлюоресцентное окрашивание метилированных H3-K9 и K27 в областях фокусов Eed–Enx1 подтвердило ранее полученные данные, показавшие, что Eed катализирует метилирование гистонов. Более того, у eed-/- мутантных мышей, Eed–Enx1 фокусы больше не образуются на Xi, а XCI нарушена. Тот факт, что метилирование H3-K9 и K27 отсутствует также у этих мышей, указывает на то, что Eed необходим для ассоциированных с XCI модификаций гистонов.
Mager et al. использовали туже самую eed-/- мутантную линию, чтобы показать, что белки этой группы Polycomb необходимы также для молчания субнабора аутосомных импринтированных локусов. Авт. отслеживали специфические импринтированные локусы с разными полиморфизмами, которые были ассоциированы с производными материнских и отцовских аллелей. Они анализировали 14 импринтированных локусов и установили биаллельную транскрипцию в половине отцовских ипринтируемых локусов у eed-/- мутантов; ниодин из матерински-репрессируемых локусов не был затронут. Бисульфатное секвенирование было использовано, чтобы сравнить статус метилирования ДНК и было установлено, что у eed-/- мышей паттерн метилирования CpG в генах с потерей импринтинга был иным, чем в генах дикого типа.
Почему потеря Eed нарушает импринтинг только в субрнаборе генов? Затрагиваемые локусы не обладают ни сходной хромосомной локализацией, они не имеют и общих паттернов метилирования в своих импринтинг-контролирующих локусах или дифференциально метилированных областях. Авт. полагают, что Eed функция м.б. ограничена определенными генами, когда Eed–Enx1 комплекс ассоциирует с ДНК связывающим белком, который распознает последовательности-мишени в разных локусах. Silva et al. подтвердили, что Eed–Enx1 вовлекаются в модификацию гистонов при XCI. Интересно бы посмотреть, происходит ли тоже самое при аутосомном молчании, и в каких случаях, м. ли быть различия в паттерне метилирования CpG в разных локусах eed-/- мышей вторичным следствием измененных состояний гистонов, как предполагает Mager et al.
Сайт создан в системе uCoz