Donaldson, K. M. et al. Ubiquitin signals protein trafficking via interaction with a novel ubiquitin binding domain in the membrane fusion regulator, Vps9p. Curr. Biol.13, 258-262 (2003) | |
Shih, S. C. et al. A ubiquitin-binding motif required for intramolecular monoubiquitylation, the CUE domain. EMBO J.22, 1273-1281 (2003) | |
Davies, B. A. et al. Vps9p CUE domain ubiquitin binding is required for efficient endocytic protein traffic. J. Biol. Chem. 2003 March 24 [epub ahead of print]
Хорошо известно, что polyubiquitin (polyUb) цепочки способствуют протесомной деградации, но но что делает monoubiquitin (monoUb)? Недавно было показано, что monoUb функционирует в переносе пузырьков (vesicular trafficking), а тепрь 3 независимые группы пролили новый свет благодрая изучению (vacuolar protein sorting 9) — дрожжевого guanine nucleotide exchange factor (GEF), который способствует слиянию пузырьков, происходящих з плазматических мембран или аппарата Golgi, с prevacuolar компартментом.
В первой работе, из Current Biology, группы Joazeiro и Supek сообщили, что CUE домен Vps9 является новым Ub-связывающим доменом. Они показали, что он взаимодействует непосредственно с monoUb, также как и с polyUb, а также подтвердили важность первого взаимодействия для везикулярного переноса (trafficking). Используя конструкцию из слитого мембранного рецептора и monoUb, они показали, что нарушение взаимодействия между monoUb и Vps9 — в результате или мутации в Ub или делетирования vps9 — вызывает накопление в цитоплазме скорее, чем в вакуолях этой конструкции. Интересно, что дефект trafficking, вызываемый мутированием Ub, м.б. устранен делецией Vps9 CUE домена. Результаты показывают, что CUE домен негативно регулирует Vps9 до тех пор, пока Ub позитивного регулирует Vps9 посредством взаимодействий с CUE доменом и что делеция этого домена делает активацию Vps9независимой от Ub.
Hicke и др., также установили, что Vps9 CUE домен взаимодействует непосредственно с monoUb и polyUb, и они установили, что ключевое взаимодействие вовлекает поверхности. Они также предположили, что Vps9 CUE домен негативно регулируетактивность Vps9. Более того, они показали, что CUE домен Vps9 необходим для обеспечения моноубиквитилирования Vps9 с помощью hect доменовой ubiquitin ligase, которая участвует в эндоцитозе рецепторов клеточной поверхности. Они пришли к выводу, что CUE домен является эволюционно законсервированным monoUb-связывающим доменом, который обеспечивает внутримолекулярное monoubiquitylation.
Данные группы Horazdovsky's совпадают с результатами предыдущих групп и подтверждают, что monoUb является регулятором Vps9. Они подтвердили, что Vps9 действует на промежуточной ступени в регуляции с помощью Ub эндоцитоза, между интернализацией и сортировкой мультивезикулярных телец. Группа Horazdovsky's склоняется в пользу идеи, что monoUb, соединяющийся с помощью CUE домена, действует, чтобы локализовать Vps9, и что CUE-обусловленное моноубиквитилирование Vps9 модулирует его GEF активность. Однако, это только начало для CUE, а точные роли этого домена и monoUb в функции Vps9 еще предстоит выяснить.