Chiang, M.-K. & Melton, D. A. Single-cell transcript analysis of pancreas development. Dev. Cell 4, 383-393 (2003) | PubMed

Чтобы определить профили транскрипции одиночных панкреатических клеток авт. модифицировали метод PCR-based cDNA amplification. Затем кДНК гибридизировали со специальными микромассивами из 95 панкреатических генов, которые включают транскрипционные факторы, сигнальные и контролирующие молекулы.

Авт. получали профили одиночных клеток, которые были выделены из панкреатического эпителия мышей ст. E10.5. Хотя на этой стадии эпителий является морфологически гомогенным, на основании их профилей авт. смогли различить 6 клеточных субтипов. Напр., выявляются клетки (тип I), которые экспрессируют только Pdx1, Nkx2.2 и Nkx6.1, клетки, которые экспрессируют также P48 (тип II) и те, которые экспрессируют также Ngn3 (тип III). Т.к. Pdx1 является самым ранним панкреатическим маркером, без которого поджелудочная железа неспособна развиваться, то Chiang and Melton предполагают, что клетки типа I являются прекрасными кандидатами на роль ранних панкреатических стволовых клеток. Т.к. клетки типа II экспрессируют P48, который является маркером экзокринной поджелудочной железы, и Nkx2.2 и Nkx6.1, которые необходимы для дифференцировки эндокринных клеток, то клетики типа II м. представлять собой предшественников большинства определенных клонов клеток. Знание разных комбинаций экспрессируемых генов позволило авт. предложить модель дифференцировки панкреатических клеток - каждой ступени в модели соответсвуют типы клеток, которые ассоциирует с разным профилями экспрессии генов.

Новый метод Chiang and Melton м.б., конечно, применен к любому развивающемуся органу, к разным стадиям развития и для определеня профилей опухолевых клеток. Он м. также использоваться для идентификации панкреатических стволовых клеток, используемых для лечения диабета.