Роль Актина

*Carreno, S. et al. Actin dynamics coupled to clathrin-coated vesicle formation at the trans-Golgi network. J. Cell Biol.* 165, 781–788 (2004) \| Article \| PubMed \| ISI \| ChemPort**
Рис. \| Transport door clathrin coated pits	Actin как известно важен для эндоцитоза . Но в The Journal of Cell Biology, Drubin и др. сообщили о новых ролях актина и HIP1R линкерного белка в отпочковывании от trans-Golgi network (TGN) покрытых клатрином clathrin-coated vesicles (CCVs), которые предназначены для лизосом. Actin участвует в образовании CCV на плазматической мембране, а короткие актиновые филаменты обнаруживаются также вблизи аппарата Гольджи в клетках млекопитающих. HIP1R действует как линкер между актиновым цитоскелетом и компонентами эндоцитотической кухни (machinery), такими как clathrin. Drubin и др. предполагают, что actin и HIP1R м. участвовать в процессе переноса пузырьков , который происходит на TGN. Первоначально флюоресцентно меченный HIP1R был идентифицирован на CCVs. которые были тесно ассоциированы с TGN. Time-lapse микроскопия затем выявила TGN-производные пузырьки, которые содержат и HIP1R и clathrin и перемещаются прочь от TGN. Эти пузырьки также содержат cation-dependent mannose-6-phosphate receptor (CD-MPR), который участвует в доставке белка к лизосомам. Подход с small interfering (si)RNA был использован для истощения экспрессии HIP1R в культивируемых клетках, это вызывало разрушение TGN. Хотя др. огранеллы, по-видимому. нормальные, цистерны Гольджи раздуты и обнаруживают скопление покрытых клатрином почек. Более того, обнаруживается увеличение размера и количества лизосом-подобных структур в этих клетках. Эти наблюдения подчёркивают нарушения переноса CCV между TGN и лизосомами и возможно также функции лизосом у HIP1R-истощенных клеток.. Активновые филаменты были обнаружены в ассоциации с TGN и CCVs в нормальных клетках, это указывает на роль актина в образовании CCV. Однако, HIP1R-истощенные клетки обнаруживают достоверное увеличение количества и размера этих актиновых структур, так что HIP1R м. негативно регулировать полимеризацию актина во время образования CCV. Более того, эта регуляция м. б. необходима для эффективного высвобождения CCV из TGN или для последующего движения CCVs. Actin-nucleating Arp2/3 комплекс также идентифицирован на TGN-производных CCVs, указывая тем самым. что он м. стимулировать, тогда как HIP1Rограничивает, сборку актина на этих структурах. Для проверки, участвует ли HIP1R в переносе от TGN на лизосомы, cathepsin D — который представлен в TGN в качестве про-энзима и созревает во время переноса в лизосомы — был изучен в экспериментах pulse-chase в HIP1R-истощеннфх клетках. Большинство про-энзимов формируют cathepsin D, который остаётся в TGN HIP1R-истощенных клеток. Обработка клеток актиновыми ядами также тяжело повреждает созревание cathepsin-D, обусловливая сохранение его в Гольджи. Итак, установлена новая роль динамики актина в переносе от TGN в лизосомы и показано, что HIP1R необходим для продуктивного соединения актиновой динамики с этим путём.

Actin участвует в образовании CCV на плазматической мембране, а короткие актиновые филаменты обнаруживаются также вблизи аппарата Гольджи в клетках млекопитающих. HIP1R действует как линкер между актиновым цитоскелетом и компонентами эндоцитотической кухни (machinery), такими как clathrin. Drubin и др. предполагают, что actin и HIP1R м. участвовать в процессе переноса пузырьков , который происходит на TGN.

Первоначально флюоресцентно меченный HIP1R был идентифицирован на CCVs. которые были тесно ассоциированы с TGN. Time-lapse микроскопия затем выявила TGN-производные пузырьки, которые содержат и HIP1R и clathrin и перемещаются прочь от TGN. Эти пузырьки также содержат cation-dependent mannose-6-phosphate receptor (CD-MPR), который участвует в доставке белка к лизосомам.

Подход с small interfering (si)RNA был использован для истощения экспрессии HIP1R в культивируемых клетках, это вызывало разрушение TGN. Хотя др. огранеллы, по-видимому. нормальные, цистерны Гольджи раздуты и обнаруживают скопление покрытых клатрином почек. Более того, обнаруживается увеличение размера и количества лизосом-подобных структур в этих клетках. Эти наблюдения подчёркивают нарушения переноса CCV между TGN и лизосомами и возможно также функции лизосом у HIP1R-истощенных клеток..

Активновые филаменты были обнаружены в ассоциации с TGN и CCVs в нормальных клетках, это указывает на роль актина в образовании CCV. Однако, HIP1R-истощенные клетки обнаруживают достоверное увеличение количества и размера этих актиновых структур, так что HIP1R м. негативно регулировать полимеризацию актина во время образования CCV. Более того, эта регуляция м. б. необходима для эффективного высвобождения CCV из TGN или для последующего движения CCVs. Actin-nucleating Arp2/3 комплекс также идентифицирован на TGN-производных CCVs, указывая тем самым. что он м. стимулировать, тогда как HIP1Rограничивает, сборку актина на этих структурах.

Для проверки, участвует ли HIP1R в переносе от TGN на лизосомы, cathepsin D — который представлен в TGN в качестве про-энзима и созревает во время переноса в лизосомы — был изучен в экспериментах pulse-chase в HIP1R-истощеннфх клетках. Большинство про-энзимов формируют cathepsin D, который остаётся в TGN HIP1R-истощенных клеток. Обработка клеток актиновыми ядами также тяжело повреждает созревание cathepsin-D, обусловливая сохранение его в Гольджи.

Итак, установлена новая роль динамики актина в переносе от TGN в лизосомы и показано, что HIP1R необходим для продуктивного соединения актиновой динамики с этим путём.