Посещений:
Апоптоз

Роль р53
Chipuk, J. E. et al. Direct activation of Bax by p53 mediates mitochondrial membrane permeabilization and apoptosis. Science 303, 1010–1014 (2004) | Article |  PubMed |  ISI |  ChemPort
The tumour suppressor p53 induces apoptosis mainly by acting as a transcription factor and promoting the expression of several proteins that are involved in apoptosis. Reporting in Science, Doug Green and colleagues have now uncovered a more direct route for p53-mediated apoptosis — similarly to BH3-only proteins, cytosolic p53 can directly activate Bax and trigger apoptosis.

Чтобы протестировать, м. ли цитотзольный p53 индуцировать апоптическую программу Green и др. предварительно обрабатывали p53-экспрессирующие клетки ингибитором ядерного импорта. Накопление в ядре p53 блокировалось, как показывает отсутствие УФЛ-индлуцированной p53-зависимой экспрессии генов. Однако, индуцированный УФЛ апоптоз сохраняется, даже в отсутствие ядерного p53. Сходным образом обработанные Bax-/- клетки были резистентны к индуципрованному УФЛ апоптозу, это указывает на то, что Bax необхоадим для индукции апоптоза в отсутствии в ядре p53. Ингибирования ядерного импорта в клетках, которые экспрессируют транскрипционно неактивную форму p53 также привродит к его цитозольному накоплению и клеточной гибели - так что цитозольная локализация p53 достаточна для индукции апоптоза.
Чтобы прояснить цитозольные эффекты p53, авт. микроинъецировали очищенный p53 — дикого типа p53, дефицитный по транскрипции p53 или p53 мутантый с отсутствием богатого пролином домена - в клетки, которые экспрессируют cytochrome-c–green-fluorescent-protein слитый белок. Дикого типа p53 и дефицитный по транскрипции мутантный белок оба индуцировали высвобождение cytochrome-c из митохондрий, тогда как мутанты, с отсутствием богатого пролином домена, не вызывали этого. Green и др. затем показали, что инкубирование очищенного p53 с изолированными митохондриями индуцирует высвобождение cytochrome-c, но только в присутствие Bax и что богатый пролином домен p53 необходим для активации Bax.
Синтетические liposomes м.б. permeabilized в присутствии Bid — a BH3-only protein — и Bax. Авт. наблюдали сходные эффекты, когда p53 и Bax добавляли к липидным пузырькам, пермиабилизация который воспроизводит таковую митохондриальной наружной мембраны. Bid и др. BH3-only protein, Bim, активируют Bax, обусловляивая его олигомеризацию. Схходным образом, дикого типа p53, но не мутантный, дефектный по богатому пролином домену, индуцирует образование облигомеров Bax. Итак, апоптическая функция цитозольного p53, по-ви димому, напоминает таковую у BH3-only proteins.
Некоторые BH3-only белки, включая Bid и Bim, соединяются с Bcl-2 и Bcl-xL. А последний блокирует апоптоз путём секвестрирования про-апоптичесих белков семейства Bcl-2, таких как Bax. Др. BH3-only белки, такие как Bad, вместо эого способствуют апоптозу путём высвобождения Bid и Bim из Bcl-2 и Bcl-xL. p53 также соединяется с Bcl-2 и Bcl-xL, и Green и др. показали, что связывание p53 с Bcl-xL высвобождает Bax и Bid от Bcl-xL. И снова это подтверждает BH3-only-типа функцию цитозольного p53.
Авт. отмечают, что эта вновь открытая функция p53 в апоптозе представляет собой ещё один пример "...an emerging complexity that exists within components of the apoptotic machinery".
Сайт создан в системе uCoz