Han, X. et al. Transmembrane segments of syntaxin line the fusion pore of Ca2+-triggered exocytosis. Science 11 March 2004 (doi:10.1126/science.1095801)
FURTHER READING Chen, Y. A. & Scheller, R. H. SNARE-mediated membrane fusion. Nature Rev. Mol. Cell Biol.2, 98–106 (2001)
WEB SITE
Xue Han, Meyer Jackson and colleagues, reporting in Science, now show that the fusion pore that forms in Ca2+-regulated exocytosis has a protein lining. Until now, the molecular composition of this important intermediate was unknown and the possibility that it was composed of lipids could not be ruled out.
Авт. полагают, что если пора слияния состоит из белка, то прохождение нейротрансмиттера через эту пору д. нарушаться мутациями, которые изменяют размеры аминокислотных боковых цепочек, выстилающих пору. Они сконцентрировали свое исследование на по нескольким причинам: напр., он существенен для экзоцитоза и он единственный важный белок плазматической мембраны, который содержит трансмембранный сегмент.
C помощью мутирования остатков в этом сегменте в направлении tryptophan и измерения тока нейротрасмиттера через fusion поры, Han et al. попытались установить, вызывает ли каждая из мутаций обструкцию пор. Они идентифицировали 3 мутации - I269W, G276W и I283W - которые существенно редуцировали прохождение через поры слияния: все эти остатки лежат вдоль одной из лицевых сторон syntaxin трансмембранной α-спирали.
Для дальнейшего изучения этого эффекта авт. создали серию мутантов, так что каждая из позиций, упомянутых выше, аминокислотной боковой цепочки постепенно увеличивалась в размере. Как и ожидалось, увеличение размера боковой цепочки в этих положениях вызывало постепенное снижение тока нейротрансмиттера через пору. Мутации остатков, не участвующих в выстилке поры, не оказывали влияния на прохождение через пору.
Han et al. поэтому предположили, что часть фузионной поры, пересекающая плазматичекую мембрану является бочёнком (barrel), который состоит из 5-8 копий трансмембранного сегмента syntaxin (хотя они не исключают, что др. белки и/или липиды также м. вносить вклад в структуру поры). Более того, они полагают, что эта синтаксиновая выстилка поры соединяется с комплементарным белком (), выстилающим пору в везикулярной мембране, с помощью SNARE комплексов.
)