До сего дня считалось, что цитоплазматическая локализация мРНК на заднем полюсе ооцита Drosophila melanogaster специфицируется с помощью лишь 3' untranslated region (UTR). Однако, отложение exon–exon junction complex (EJC) человека на мРНК оказалось сплайсинг-зависимым и независимым от РНК-последовательностей, а два компонента EJC человека оказались гомологичными D. melanogaster EJC белкам, которые необходимы для локализаци мРНК oskar. Это подвигло авт. исследовать, не м. ли сплайсинг регулировать локализацию мРНК oskar.
Hachet и Ephrussi нашли, что делетирование всех трёх интронов oskar не влияет на транспортацию этой т. наз. oskΔi(1,2,3) мРНК в ооцитах трансгенных мух, у которых не продуцируется эндогенной oskar мРНК. Однако, в средине оогенеза локализация oskΔi(1,2,3) мРНК оказывается дефектной (дифузной), и только небольшие количества присутствуют на заднем полюсе во время позднего оогенеза. Серия делеций интронов показала, что только интрон 1 необходим для локализации oskar мРНК. Локализация EJC белка, зависимая от oskar-мРНК, на заднем полюсе также обнаруживает зависимость только от присутствия интрона 1, который детерминирует локализацию и oskar мРНК?
тобы ответить на этот вопрос авт. замещали последовательности интрона 1 последовательностями интрона 3. Такая osk(i3 in i1) мРНК правильно располагается на заднем полюсе, как и Y14. Итак, последовательности интрона 1 сами по себе не важны для локализации, а важен сплайсинг первого межэкзонного соединения.
Хотя транскрипты oskar с отсутствием 3' UTR неспособны локализоваться правильно, эти результаты указывают на то, что только 3' UTR не достаточно для локализации oskar мРНК. Hachet и Ephrussi установили, что oskar 3' UTR м. только управлять локализацией в присутствии (соотв. сплайсированной) эндогенной oskar мРНК, и что это не зависит от белка Oskar, это указывает на то, что др. белки также участвуют. Итак, очевидно, что 3' UTR способствует сплайсинг-зависимой сборке oskar мРНК в oskar mRNP комплекс. И как EJC компоненты Y14 и необходимы для локализации oskar мРНК, так и сплайсинг-зависимая депозиция EJC в первом межэкзонном соединении, которая помещает сплайсинг oskar мРНК в корректное цитоплазматическое местопложение на заднем полюсе ооцита.
Авт. полагают, что тем, где EJC откладывается на молекуле мРНК, и предопределяется архитектура localization complex, который формируется (путём обеспечения взаимодействий между факторами, которые соединяются с различными областями мРНК). В целом предполагается, что это м. объяснить, почему EJC не всегда участвует в локализации цитоплазматической мРНК.