Посещений:
Репарация Двойных Разрывов

ATM, Artemis Путь
Riballo, E. et al. A pathway of double-strand break rejoining dependent upon ATM, Artemis and proteins locating to γ-H2AX foci. Mol. Cell 16, 715-724 (2004) |  Article |  PubMed |  ChemPort



Рис. с сайта http://www.mskcc. org/mskcc/html/50620.cfm.  | Double-strand break repair by recombination-directed replication. A. D loops formed by the combination of RecA, RecBCD and SSB are the substrate for both a nonspecific strand-displacement DNA synthesis reaction (no PriA) and for assembly of a bona fide replication fork (with PriA). B and C. Omission experiments showing the requirements for the various components of the reaction.

A painstaking new analysis fills in some important gaps in our knowledge of how the human genome repairs the double strand breaks (DSBs) in DNA that are induced by ionizing radiation (IR).
Ataxia telangiectasia (AT) является наследственным нарушением со сложной молекулярной этиологией. AT клетки обнаруживают дефекты КПП (checkpoint) клеточного цикла; они также высоко чувствительные к IR-индуцированным DSBs, это указывает на то, что ATM - белок, который мутантен при AT - участвует в реакции на DSBs. Т.к. связь между этими двумя фенотипами неизвестна, то механизм, который лежит в основе этой чувствительности, кажется мистическим, т.к. выясняется роль фосфорилированной формы варианта гистона H2A (γ-H2AX) и др. белков, которые собираются на IR-индуцированном месте DSB.
Парадоксально, но AT клетки подвергаются V(D)J рекомбинации - процессу, который использует DSBs и недавно идентифицированную нуклеазу, Artemis. Artemis-дефицитные клетки, хотя они также радиационно-чувствительны, эффективно репарируют DSBs.
Тщательное сравнение образования DSB и репарации в ATM- и Artemis-дефектных клетках Riballo et al. показало, что и ATM и Artemis необходимы для репарации субнаборах DSBs, которые медленно воссоединяются после фазы быстрой потери γ-H2AX фокусов. Всё это указывает на то, что ATM и Artemis оперируют на общем пути 'медленного воссоединения' DSB.
Очевидно, что хотя большинство DSBs воссоединяется быстро и нуждается в главных не-гомологичных воссоединяющих концы белках, отдельная фракция воссоединяется более медленно и нуждается в ATM и Artemis.
Чтобы понять, м. ли ATM-зависимый путь участвовать в процессинге концов, авт. индуцировали высокой сложности DSBs, которые скорее всего нуждались в процессинге концов прежде воссоединения как в случае низкой сложности DSBs. Четкая корреляция между сложностью DSB и величиной ATM-зависимого воссоединения DSB строго указывает на то, что ATM-зависимый путь участвует в процессинге концов.
Авт. показали, что индуцированное радиацией гиперфосфорилирование не происходит в клетках, экспрессирующих меченную Artemis кДНК, которые были обработаны ингибитором ATM - это является строгим доказательством роли ATM в этом процессе.
Авт. сформулировали интересную модель двухфазного воссоединения DSBs, согласно которой ATM гиперфосфорилирует Artemis, активируя ее nuclease и end-processing способность. Др. белки - такие как 53BP1, H2AX, Nbs1 и Mre11 - м. обеспечивать поддержку, которая удерживает Artemis в местах DSB и/или активируют ATM.
Независимо от того насколько аккуратна модель идентификация Artemis в качестве ниже стоящего компонента пути передачи сигналов ATM делает шаг вперед н долгом пути в объяснении радиочувствительности при AT .
Сайт создан в системе uCoz