Критический аспект передачи биологических сигналов выявляется когда он остановлен. Др. важным аспектом является то, как остановлен. Этот вопрос уже разрешен в конспекте передачи сигналов epidermal growth factor receptor (EGFR) у Drosophila melanogaster. В Nature, Klein et al. сообщили, что секретируемый белок Argos функционирует как антагонист передачи сигналов EGFR за счёт секвестрирования EGF лиганда Spitz

EGFR

Было предположено, что Argos м. непосредственно взаимодействовать с EGFR, чтобы стабилизировать аутоингибирующую конформацию, поэтому они изучали взаимодействия Argos, EGFR и Spitz, используя очищенные рекомбинантные формы белков в surface-plasmon-resonance исследованиях. Неожиданно, в противовес их предположению, Argos и EGFR не взаимодействовали. Но Argos взаимодействовал с Spitz в 1:1 комплексе. Argos соединялся с EGF-подобным доменом Spitz, a Spitz соединялся с С-терминальной частью Argos.

На основании этих данных Klein et al. предположили, что т.к. Spitz не связывается с Argos или EGFR, то Argos м. функционировать 'уводя' Spitz прочь от EGFR и блокируя его EGFR-связывающий сайт - аналогично антагонистам передачи сигналов insulin-like growth factor-1 или bone morphogenetic protein. При добавлении увеличивающихся количеств Argos к фиксированной концентрации свободного Spitz и тестировании связывания рецепторов, авт. смогли показать, что Argos устраняет взаимодействие Spitz-EGFR. Это особенно эффективно, когда Argos и Spitz были представлены в одной и той же концентрации, соотношение связывания 1:1 .

В клеточном контексте добавление увеличивающихся количеств Argos прогрессивно снижало Spitz-индуцированное фосфорилирование тирозина EGFR. Когда Klein et al. использовали флюоресцентно меченные рекомбинантные белки, чтобы пометить клеточную поверхность, то они нашли, что только Spitz связан с поверхностью клеток, которые экспрессировали EGFR, и это связывание уменьшалось, если Argos был добавлен в тоже самое время или перед этим. Однако, Argos не м. удалять Spitz из уже сформированных Spitz-EGFR комплексов на клеточной поверхности, это привело авт. к заключению, что Argos не может отменить активацию EGFR, если она уже была индуцирована.

Эти находки выступают против предположений, что Argos является антагонистом EGFR лиганда. Более того, этот механизм ингибирования больше согласуется с тем, что др. сигнальные антагонисты секвестрируют стимулирующие лиганды. Т.к. Argos является Spitz-индуцированным антагонистом Spitz, то авт. предполагают, что локальная продукция Argos м. эффективно ограничивать передачу сигналов на дальние расстояния с помощью Spitz во время развития D. melanogaster.