Duane R Wesemann, Hongwei Qin, Natalia Kokorina & Etty N Benveniste TRADD interacts with STAT1-α and influences interferon-γ signalling Nature Immunology , 5, 199–207 (February 2004) |
Провоспалительные цитокины tumor necrosis factor alpha и interferon gamma высвобождаются макрофагами как часть реакции хозяина в ответ на инфекцию. Они активируют отдельные сигнальные пути (см. напр., ). Адапторный белок TNF receptor 1-associated death domain protein является позитивным регулятором передачи сигналов TNF-α. Эта активация обеспечивается путём взаимодействия TRADD с транскрипционным фактором , компонентом IFN-γ сигнального пути. Wesemann et al. показали, что STAT1-α обеспечивает также репрессию передачи сигналов IFN-γ с помошью TRADD независимо от его активирующей роли в передпаче сигналов TNF-α.
Соединение IFN-γ со своим рецептором ведёт к фосфорилированию тирозина STAT1-α, в результате происходит димеризация и ядерная локализация. STAT1-α гомодимеры соединяются с γ-activation site (GAS) d IFN-γ-индуцибельных промоторах. Транскрипционная активность STAT1-α усиливается вследствие фосфорилирования серина. IFN-γ индуцированное образование комплекса STAT1-α-TRADD наблюдается в glutathione-S_transferase (GST) 'pull-down' экспериментах. Экспрессия TRADD siRNA ведет к увеличению фосфорилирования тирозина и серина, приводя к более сильной и более продолжительной связывающей активности STAT1-α-ДНК и к последующей активации в ответ на IFN-γ. IFN-γ, но не TNF-α, индуцирует образование комплекса STAT1-α-TRADD in vivo. TRADD взаимодействует также с др. членами семейства STAT, такими как и , подтверждая тем самым, что это является broader paradigm of TRADD function. Иммунофлюоресценция и субклеточное фракциоирование показали, что TRADD перемещается в ядро независимо от STAT1-α.
Проверяли эффект пониженных уровней TRADD на экспрессию IFN-γ-чувствительные гены. Из 17 проверенных генов, 13 обнаруживали строгую IFN-γ реакцию в клетках с пониженным уровнем TRADD, подтвержая негативную роль TRADD в IFN-γ реакции. Наконец, иммунопреципитация хроматина показала, что IFN-γ индуцирует in vivo ассоциацию STAT1-α, но не TRADD, с промоторами IFN-γ-индуцибельных генов.
Хотя работа и даёт приемлемое объянение модуляции передачи сигналов IFN-γ с помошью TRADD, необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить молекулярные механистические детали TRADD ингибирования STAT1-α; напр., каковы эффекты STAT1-α мутантов устойчивых к фосфорилированию и что будет происходить, если ядерный импорт TRADD будет блокирован? This should lead to a greater understanding of - and consequently the potential for therapeutic intervention of - the proinflammatory cytokine response to human infection.