Хорда является структурой срединной линии мезодермального происхождения, которая характеризует эмбрионов хордовых. В раннем эмбриогенезе хорда является важной для обеспечения структурной поддержки эмбриона (Adams et al., 1990) и формирования паттерна соседних тканей, таких как нервная трубка, сомиты и эктодермальные производные (Cleaver, Krieg, 2001)/ У эмбрионов Xenopus клетки презумптивной хорды возникают из дорсальной маргинальной зоны на стадии гаструлы. Клетки дорсальной маргинальной зоны скручиваются внутрь, погружаясь внутрь эмбриона, и формируют головную и дорсальную мезодерму ниже эктодермы. Вскоре после начала гаструляционных движений клетки хордомезодермы срединной линии постепенно становятся отличимы от параксиальной мезодермы и подвергаются четкой дифференцировке. Ранние хордальные гены, такие как Brachyury, chordin и Xnot экспрессируются в области организатора в начале стадии гаструлы и постепенно оказываются ограниченными хордой (Smith et al., 1991; Gont et al., 1993; Sasai et al., 1994). На ст. нейрулы (ст. 12.5-18) клетки хорды подвергаются динамической морфологической дифференцировке и начинают экспрессироваться др. хордальные гены, такие как collagen type II (Su et al., 1991). На ст. ранней хвостовой почки (ст. 23-28), клетки хорды становятся зрелыми в передне-заднем направлении. Внутри каждой клетки формируется крупная вакуоль и вся ткань хорды становится окруженной фиброзной оболочкой (Adams et al., 1990; Hausen, Riebesell 1991; Shih, Keller 1992a;b; Domingo,Keller 1995). На ст. головастика (ст. 32) клетки всей хорды подвергаются вакуолизации, а экспрессия ранних хордальных генов постепенно затухает. Хотя образование и функция хорды во время раннего органогенеза активно изучалась, но мало известно о том, как регулируется дифференцировка клеток хорды на генетическом уровне.

Входе скрининга генов, экспрессируемых в развивающейся хорде, мы выделяли Xenopus Btg2 (XBtg2) B cell translocation gene 2 (Btg2, называемый также PC3 у крыс и TIS21 у мышей) является членом семейства антипролиферативных генов, которые определяются по двум коротким законсервированным доменам (BTG Boxes A и В)? разделенным спейсерными последоватеностями из 20-25 незаконсервированных аминокислот (Guehenneux et al., 1997). Сегодня идентифицировано 6 членов у позвоночных: Btg1, Btg2/TIS21/PC3, Btg3/Tob5/ANA, Btg4/PC3B, Tob, Tob2) (Rouault et al., 1993; Guehenneux et al., 1997; Yoshida et al., 1998; Ikematsu et al., 1999; Matsuda et al., 2001). Было установлено, что Btg2 экспрессируется в дифференцирующихся нейрональных клетках, которые переключаются с пролиферативных к нейрон-генерирующим делениям. Btg2 негативно регулирует клеточный цикл и способствует нейрональной дифференцировке (Canzoniere et al., 2004; Iacopetti et al., 1994;1999; Walden et al., 1998; Malatesta et al., 2000; Corrente et al., 2002; el-Ghissassi et al., 2002). Точная молекулярная функция Btg2 неизвестна, но предполагается, что Btg2 действует как адапторная молекула, модулируя активности взаимодействующих с ней белков и регулируются экспрессию генов. Кстати, Btg2 непосредственно взаимодействует с и позитивно регулирует carbon catabolite repressor protein (CCR4)-associated factor 1 (CAF1), PRMT1 (protein arginine methyltransferase), Hoxb9 и Smad 1 и Smad8 (Berthet et al., 2002; Rouault et al., 1998; Prevot et al., 2000; 2001). Btg2,следовательно, скорее всего важен для контроля клеточного цикла и тканевой дифференцировки во время эмбриогенеза.

В данном исследовании был охарактеризован XBtg2 в эмбриогенезе Xenopus/ Изучали временную и пространственную экспрессию транскриптов XBtg2 и осуществляли функциональный нокдаун с использованием антисмысловых morpholino олигонуклеотидов. полученные данные показали, что XBtg2 необходим для процесса дифференцировки клеток хорды до формирования вакуолей и после их спецификации.