Посещений:
Neural differentiation from human embryonic stem cells in a defined adherent culture condition | |
|
Понимание, как управлять human embryonic stem cells (hESCs) направляя на специфический путь клонального развития и на создание соотв. типов клеток, безусловно очень важно не только для биологии развития, но и такэже для использования этих клеток при лечении болезней человека. В данном исследовании hESCs дифференцировали в нейральный клон в определенной прикрепленной к субстрату культуре с помощью ретиноевой кислоты и basic fibroblast growth factor. Наш протокол, по-видимому, воссоздает ранние ступени развития нервной системы in vivo, и так что недифференцированные hESCs организуются в розетки и затем нейральные трубко-образные структуры. Дифференцирующиеся клетки экспрессируют нейроэктодермальные и зрелых нейронов маркеры, характерные для нервной пластинки, образования трубки и созревания, что было продемонстрировано с помощью reverse transcriptase-PCR. Более 90% дифференцированных клеток экспрессировали дополнительные специфичные для нейронов антигены (напр., tubulin-III, MAP-2, synaptophysin и белок нейрофиламент). Ультраструктурный анализ дифференцирующихся сходных с нервной трубкой структур в трехмерном коллагеновом каркасе выявил сходный с эпендимой слой и нейральные структуры с типичными синапсами. Эти результаты демонстрируют простую и довольно определенную систему дифференцировки hESCs в нейральные клоны, практически в нейроны с типичными клеточными, молекулярными и ультраструктурными маркерами. Культура клеток нейральных предшественников в коллагеновом окружении может предоставить новый подход для репарации повреждений спинного мозга.
|