Замещение обычного гистона H3 вариантом H3 в центромерном хроматине как полагают, создает структурную основу для сборки кинетохор. Но как связаны центромер-специфичная сборка нуклеосом и образование кинетохор неясно. В трех недавних исследованиях идентифицирован негистоновый Scm3 белок, который важнен для рекрутирования на и для сборки варианта H3 гистона Cse4 в центромерном хроматине почкующихся дрожжей. Неожиданно стрежневые гистоны H2A и H2B исчезают из центромерного хроматина, тогда как Cse4 и Scm3 и гистон H4 остаются.
Mizuguchi et al. и Camahort et al. выделили Scm3 из иммуноочищенной Cse4 фракции. Scm3 иммунопреципитируется с Cse4 и vice versa, но не с гистоном H3. Scm3 также был идентифицирован Stoler et al. путем скрининга дозовых супрессоров кондиционных cse4аллелей. Исследование иммунопреципитации хроматина всеми группами показало, что Scm3 локализуется специфически на центромерах. Используя кондиционных мутантов Scm3 и Cse4, эти группы также продемонстрировали, что Cse4 и Scm3 зависят др. от др. в отношении своей локализации на центромере, это указывает на то, что Scm3 необходим для образования центромер.
Кроме того, Camahort et al. показали, что Scm3 ко-иммунопреципитируется с кинетохорным белком Ndc10, который необходим для локализации Scm3 на центромерах. Напротив, Scm3 является существенным для связывания с центромерами некоторых кинетохорных белков, включая Ndc10, который, как полагают, является первостепенным кинетохорным белком, который локализуется на центромереt и инициирует образование кинетохор. Благодаря физической ассоциации между Scm3 и Ncd10,авт. предполагают, что Scm3 может быть 'отсутствующим звеном', которое соединяет Ndc10-обусловленное образование кинетохор с рекрутированием Cse4 на центромеры.
Каково же значение Scm3 для функции кинетохор? Все группы показали, что деплеция Scm3 приводит к аресту G2-M клеточного цикла и к дефектам расхождения хромосом - эти фенотипы согласуются с дефектами функции кинетохор. Кроме того, Camahort et al. и Stoler et al. показали, что Scm3 необходим для поддержания функции кинетохор в течение всего клеточного цикла, что подкрепляет предположение, что Scm3 может помогать рекрутированию кинетохорных белков иных чем Ndc10, и/или что Scm3 существенен для непрерывной загрузки Ndc10 которая, необходима для поддержания способных к сегрегации кинетохор.
Mizuguchi et al. сделаи поразительное наблюдение, что центромерный хроматин содержит Cse4 и Scm3, но лишен гистонов H2A и H2B in vivo. Экспрессируемый бактериями Scm3 формирует стоихометрический комплекс с Cse4 и H4 in vitro. Ещё более поразительно то, что когда Scm3 был добавлен к предварительно собранным Cse4-содержащим гистоновым октамерам in vitro, то он замещал H2A-H2B из комплекса. Это несоответствие коррелирует с пониженной in vivo овладением гистонами H2A и H2B, по сравнению с H4, на центромерах в scm3 кондиционной линии при пермиссивнгых условиях. Было интересно посмотреть теперь упаковку нуклеосом центромерной ДНК у высших организмов - кто знает, какие сюрпризы следует ожидать в будущем в отношении lhm специализированных упаковок нуклеосом.