Thermann and Hentze воспроизвели miR2-обусловленное ингибирование трансляции у Drosophila melanogaster мРНК reaper , используя беклеточную систему. Неожиданно, в присутствии cycloheximide, который блокирует трансляционную элонгацию и формирование полисом, miR2 индуцировала образование не-полисомных мРНК рибонуклеопротеиновых комплексов, которые имели седиментационные характеристики полисом. Образование таких 'pseudo-polysomes' индуцируется также с помощью miR2 в присутствии non-hydrolysable GTP аналога, который ингибирует объединение 60S рибосомальных субъединиц. Эти находки подтверждают, что сборка псевдо-полисом не зависит от образования 80S рибосомных комплексов.

Затем авт. синтезировали mutant-capped репортерные мРНК, которые были неспособны обеспечить cap-зависимую инициацию трансляции. Трансляция mutant-capped мРНК резистентна к miR2-обеспечиваемой репрессии, это сопровождается редукцией образования 80S рибосомных комплексов (в соответствии со снижением эффективности трансляции mutant-capped мРНК). Напротив, псевдо-полисомы формировались нормально на mutant-capped репортерных мРНК. Итак, miR2 действует посредством ингибирования cap-зависимой инициации трансляции, а образование псевдо-полисом не достаточно для ингибирования трансляции. Эти находки находятся в противоречии с недавним анализом клеток Caenorhabditis elegans и людей, который подтверждает miRNA-обеспечиваемый механизм, который действует после инициации трансляции.Однако, открытие псевдо-полисом делает возможным альтернативное объяснение ранее описанных 'polysome-associated' мРНК. Необходимость образования псевдо-полисом для ингибирования неясна, но авт. полагают, что они могут представлять собой структуры 'P-body-type'.

Испоьзуя биохимический подход, Chendrimada et al. для идентификации новых факторов в пути miRNA человека. Они выделили минимальный RNA-induced silencing complex (RISC), который был ассоциирован с дополнительными факторами, включая RNA helicase MOV10, белок из 60S рибосомальной субъединицы и регуляторный фактор eIF6. Принимая во внимание, что eIF6 ингибирует образование 80S рибосом, возможно ли, что eIF6 играет роль в miRNA-обеспечиваемой супрессии? В самом деле, нокдаун eIF6 выявляет пост-транскрипционную репрессию с помощью MIRNALET7B и MIR125B в репортерных подходах в трансфицированных клетках человека.

Более того, молчание эндогенных lin-14 и lin-28 мРНК мишеней с помощью lin-4 miRNA у C. elegans ингибируется в условиях eif-6-нокдауна. Кроме того, истощение EIF-6 уменьшает lin-4-зависимую негативную регуляцию уровней белков LIN-14 and LIN-28. Эти данные подтверждают консервативную роль eIF6 в пути miRNA и подчеркивают роль EIF-6 как ключевого фактора, необходимого для lin-4 miRNA для регуляции её мишеней во время развития C. elegans. Возможно, что eIF6 репрессирует трансляцию путем блокирования инициации рециклинга рибосом. Авт. предлагают модель, согласно которой eIF6 помогает "disrupt productive polysome formation and expose the target mRNA for degradation."