являются ретиноевая кислота, аналоги цитоидина, ингибиторы istone-deacetylase и ингибиторы протеин киназ (Fig. 2). Эти химические соединения используются для модулирования и вычленения фенотипов стволовых клеток и могут выполнять роль в лечении болезней, вызванных нарушениями стволовых клеток или клеток предшественников, напр., при некоторых типах рака.
Способность выделять стволовые клетки и клетки предшественники из тканей и манипулировать с ними
in vitro открывает несколько привлекательных возможностей. Она может предоставить модельные системы для понимания врожденной регуляции этих клеток и их взаимодействий с экзогенными сигналами, включая те, что лежат в основе развития и болезней. Более того, контроль экспансии за счет самообновления и дифференцировки необходимы для генерации достаточных количеств гомогенных функциональных клеточных типов для клеточной терапии.
Self-renewal
Плюрипотентные стволовые клетки дают все типы клеток тела. Они обычно включают следующие: обычные ES клетки. произошедшие из внутренней клеточной массы преимплантационных эмбрионов13; стволовые клетки и производные зародышевой линии14-16; стволовые клетки эпибласта, происходящие из эмбрионов стадии эпибласта после имплантации17,18; и induced pluripotent stem (iPS) клетки, полученные из соматических клеток11. Т.к. ES клетки являются превосходной моделью плюрипотентных стволовых клеток, то мы сконцентрируемся на регуляции ES с помощью химических подходов.
Традиционно ES клетки поддерживаются и размножаются в присутствии питающих клеток, сыворотки и дополнительных экзогенных факторов13,таких как leukaemia inhibitory factor (LIF) для мышиных ES клеток и basic fibroblast growth factor (bFGF; известного также как FGF2) для ES клеток человека. Использование таких традиционных культуральных условий вызывает ряд проблем. Во-первых, такие условия очень изменчивы как на пути использования питающих клеток, так и состава сывороточных продуктов. Т.о., поддержание в широком масштабе соответствующих и здоровых долговременных культур ES клеток является важной задачей. Во-вторых, неизвестные факторы из питающих клеток и/или сыворотки, также как и некоторые определенные экзогенные факторы могут склонять ES клетки в направлении приобретения специфических клональных свойств дифференцировки. Они делают это путем модулирования экспрессии дополнительных генов, которые сосуществуют с базовой сетью плюрипотентности. Это усиливает существующую сложность клеточных ES линий, особенно у людей. Разные ES клеточные линии обнаруживают разные свойства самообновления, а также обнаруживают разную склонность к дифференцировке в разные клоны (или разные подтипы одного и того же клона) благодаря их собственному генетическому и эпигенетическому фону19. В-третьих, неизвестные факторы могут оперировать в сочетании со специфическими воздействиями, чтобы изменить исход определенных клеточных процессов.
Для решения этих проблем мы осуществили высокопроизводительный скрининг 50,000 синтетических малых молекул, используя трансгенные репортерные линии мышиных ES клеток, экспрессирующих green fluorescent protein (GFP) под контролем регуляторных элементов гена Oct4 (гена, специфически экспрессирующегося в плюрипотентных стволовых клетках). Скрининг проводился в отсутствие питающих клеток, сыворотки и LIF, чтобы найти малые молекулы, которые могут поддерживать самообновление ES клеток в химически определенных условиях. Экспрессия OCT4-GFP и характерная компактная куполообразная морфология колоний мышиных ES клеток были использованы в качестве критериев для первичного отбора хитов скрининга. Затем конформационные методы и исследования взаимоотношений между структурой и функцией привели к идентификации нового соединения, названного pluripotin (известен также как SCI)6. Pluripotin поддерживает гомогенное самообновление мышиных ES клеток в долговременных химически определенных культуральных условиях в отсутствие питающих клеток, сыворотки и LIF , а также bone morphogenetic proteins (BMPs). Эти клетки остаются плюрипотентными в постоянно пассируемых культурах in vitro без потери ими своей способности germline передачи in vivo6. Более того, pluripotin действует независимо от экзогенных путей активации LIF-STAT3, BMP-SMAD-ID и WNT-β-catenin. C помощью экспериментов по ослаблению сродства, используя pluripotin-лишенный подвижности матрикс, были идентифицированы молекулярные мишени для pluripotin как RasGAP и extracellular-signal-regulated kinase 1 (ERK1), два эндогенно экспрессируемые белка с активностью, индуцируемой дифференцировкой. Дополнительные биохимические, генетические и фармакологические исследования показали. что одновременное ингибирование ERK1 и RasGAP с помощью pluripotin или др. независимых методов оказалось достаточным для долговременного самообновления мышиных ES клеток6.
Это исследование демонстрирует, что контроль сложного фенотипа (или лечение болезни) может нуждаться в более чем одной мишени. Одиночная малая молекула с желаемой, специфической полифармакологической активностью может быть получена благодаря рационально подготовленному фенотипическому скринингу. В отношении перспектив стволовых клеток было предположено, что самообновление ES клеток и вообще-то др. типов стволовых клеток также может в основном управляться врожденными регуляторами в клетках и не нуждается в активации дополнительных путей с помощью экзогенных факторов, таких как LIF или BMPs20.
Поддержание самообновления стволовых клеток может рассматриваться просто как использование множественных процессов продолжающейся пролиферации, также как и ингибирование дифференцировки и клеточной гибели. Для этого необходим тонкий баланс и перекрестная регуляция между позитивными и негативными регуляторами. Стволовые клетки могут автономно экспрессировать почти все генные продукты, которые существенны для самообновления. Однако эндогенная экспрессия некоторых генов, индуцирующих дифференцировку, на определенном уровне в недифференцированных ES клетках может вызывать дифференцировку в культуральных условиях, которые не способны ингибировать их негативные эффекты. Следовательно, ключом к достижению самообновления ES клеток может быть ингибирование негативных эффектов эндогенно экспрессируемых, белков, ингибирующих плюрипотентность (напр., белков, участвующих в дифференцировке или гибели клеток).,
Сбалансированное состояние самообновления также может быть достигнуто за счет специфической комбинации множественных путей активации с помощью экзогенных факторов (напр., LIF, BMPs и WNT белков для ES клеток мышей20 или белков bFGF, activin и WNT для человеческих ES клеток21,22). Хотя эти экзогенные факторы при соотв. концентрациях ингибируют др. у др. дифференцирующую активность, они могут также обеспечивать клон-специфическую экспрессию генов, которые сосуществуют с сетью генов плюрипотентности, или индуцируют дифференцировку в специфические клоны. Эта идея была подтверждена в независимом исследовании, в котором комбинация трех специфических химических ингибиторов протеин киназных FGF receptor (FGFR), mitogen-activated protein kinase kinase (MEK) и glycogen-synthase kinase 3 (GSK3) поддерживала образование и долговременное самообновление мышиных ES клеток в отсуствие экзогенных цитокинов68. Пригодны эти химические соединения не только для предопределения условий клеточных культур и регуляторных механизмов (замещение экзогенных факторов и предоставление платформы для поддержания более надежных и здоровых клеточных культур) , но они также присутствуют и при др. благоприятной возможности по получению новых клеточных линий от линий или видов, для которых это затруднительно. Напр., комбинация трех ингибиторов FGFR, MEK и GSK3 была использована для получения ES клеток от линий мышей CBA и Stat3-/- мышей.
Малые молекулы могут действовать внутриклеточно, чтобы ингибировать ключевые белки, вызывающие дифференцировку, обходя тем самым необходимость в экспрессии рецепторов для экзогенных факторов, которые ингибируют дифференцировку. Позитивные результаты были получены при использовании химических подходов для получения плюрипотентных стволовых клеток от др. видов (напр., крыс и человека) , которые напоминали значительно больше традиционные ES клетки мышей на ст. внутренней клеточной массы. С этим согласуются и недавние находки17,18 , что традиционные ES клетки человека представляют плюрипотентные клетки ст. позднего эпибласта и обладают определенными свойствами, общими с эпибластными стволовыми клетками грызунов.
Различные экзогенные ростовые факторы, включая bFGF7,8,22, TGF-β и activin21,23, WNT белки7,24 и insulin-like growth factor25, поддерживают самообновление ES клеток человека в химически определенных условиях. Идентификация малых молекул, которые действуют подобно pluripotin ES клетки мышей может привести к улучшению контроля за судьбами ES клеток человека. Напр., чрезвычайно плохая жизнеспособность диссоциированных одиночных ES клеток людей является проблемой для рутинного крупномасштабного культивирования и клональной селекции ES клеток человека26. Тестирование caspase и протеин-киназных ингибиторов идентифицировало ингибитор протеин киназы ROCK, известной как Y-27632, которая делает возможной выживание диссоциированных ES клеток человека. Недавно мы осуществили широкомасштабный скрининг комбинаторных химических библиотек ES клеток людей и идентифицировали характерные малые молекулы, которые могут замещать bFGF для поддержания долговременного самообновления человеческих ES клеток в отсутствие питающих клеток и сыворотки в химически определенной среде или могут способствовать выживанию одиночных ES клеток людей. Дальнейшая характеристика механизмов. участвующих в действии эти х малых молекул д. помочь лучше понять биологию ES клеток человека.
В противоположность прогрессу, достигнутому с ES клетками, поддержание долговременных самообновляющихся тканеспецифических стволовых клеток (Fig. 3Aa), особенно на наиболее примитивной стадии, остается проблематичным. Напр., долговременные haematopoietic stem cells (HSCs) быстро теряют свою способность восполнять всю гематопоэтическую систему во время культивирования in vitro , несмотря на использование множественных экзогенных белковых факторов. Сходным образом, условия с ростовыми факторами (напр., bFGF и/или EGF) позволяют только увеличиваться примитивным нейральным стволовым клеткам лишь ограниченное число генераций in vitro. В таких условиях они обычно становятся более ограниченными глией и теряют способность формировать паттерна субтип-специфических типов нейронов27. Обнаружение малых молекул. которые ингибируют их дифференцировку было бы очень кстати. в
С этой целью в недавнем исследовании
28 использовали подобный химический подход для изучения мультипотентных islet1 (Isl1)
+ сердечно-сосудистых клеток предшественников (MICPs), которые располагаются как в эмбриональном, так и взрослом сердце. MICPs могут генерировать три основные кардиальные типы клеток: кардиальные мышцы, гладкие мышцы и эндотелиальные клетки
29. Высокопроизводительный скрининг проводили для идентификации малых молекул, способных индуцировать экспансию MICPs; Isl1-LacZ использовался в качестве маркера. Идентифицировано несколько соединений, которые существенно увеличивали экспансию MICP, при этом мощный ингибитор GSK3, BIO оказался наиболее сильным. Это открытие привело к серии
in vitro и in vivo исследований роли WNT-β-catenin сигнала (как секретируемого клетками кардиальных мезенхимных ниш), который действует последовательно, сначала блокируя спецификацию MICPs из мезодермальных клеток предшественников и затем способствуя их самообновлению путем ингибирования их дальнейшей дифференцировки в кардиомиоциты и гладкомышечные клетки. Интересно, что воздействие BIO вызывает также экспансию человеческих Isl1
+ клеток сердечно-сосудистых предшественников, это указывает на консервативную роль WNT-обеспечиваемой передачи сигналов в самообновлении MICPs.
Differentiation
Обычная дифференцировка ES клеток является неэффективным и неспецифическим процессом, типично связанным с ко-культивированием с питающими клетками30,31 или ростом их в суспензии для образования эмбриоидных тел в присутствии сложных сывороточных и дополнительных факторов. Интересующие типы клеток затем отбирают из гетерогенной клеточной популяции с помощью маркеров экспрессии. Получение малых молекул и/или химически определенных условий для более эффективной дифференцировки стволовых клеток, потребовало существенных усилий по практическим причинам и для улучшения понимания механизмов, регулирующих дифференцировку.
Успехи биологии развития ведут к созданию направленной, ступенчатой дифференцировки стволовых клеток способами, которые воспроизводят ход эмбрионального развития. Это было достигнуто благодаря последовательной обработке клеток комбинациями эмбриональных сигнальных молекул. Элегантным примером явилась генерация функциональных моторных нейронов из мышиных ES клеток сначала с помощью neuralizing и caudalizing (дифференцирующих и паттерн-формирующих) клеток с помощью ретиноевой кислоты. Затем клетки ventralized (позиционировались) с помощью специфических малых молекул, агонистов hedgehog-обеспечиваемого сигонального пути32. Концептуально сходные, но технически более сложные методы были также разработаны для направления дифференцировки человеческих ES клеток по определенным путям: клетки нейральных предшественников -> субтип специфические клетки нейрональных предшественников -> зрелые функциональные нейроны33,34; мезоэнтодерма -> мезодерма -> клетки середечно-сосудистых предшественников -> незрелые типы кардиальных клеток -> зрелые кардиомиоциты35,36; и мезоэнтодерма -> дефинитивная энтодерма -> примитивная кишечная трубка -> задняя часть передней кишки -> панкреатическая энтодерма -> клетки эндокринных предшественников -> гормон-продуцирующие эндокринные клетки9,37.
Чтобы существенно увеличить гомогенность, функциональность и урожай промежуточных клеток предшественников или терминально дифференцированных типов клеток, необходимо более точное знание клональной спецификации. Т.о., крайне важно идентифицировать дополнительные малые молекулы (Fig. 3 Ab) , которые могут действовать синергично с факторами, которые уже определены, такими как FGF и WNT белки. Конечной целью является разработка специфической, эффективной и полностью химически определенной среды. Чтобы приблизиться к этой цели использовали high-content imaging-based анализ иммуноокрашенных клеток нейрон-специфическим маркером, чтобы идентифицировать новую синтетическую малую молекулу, названную neuropathiazol из огромной химической библиотеки. Эта молекула может специфически индуцировать нормальную дифференцировку первичных мультипотентных нейрональных клеток предшественников гиппокампа в нейроны, даже при глиогенных условиях
38. Недавно скрининг библиотеки фармакологически активных соединений с использованием нейросфер и простого гомогенного подхода были идентифицированы лекарства и эндогенные метаболиты для ингибирования пролиферации нейросфер
39 и/или способствующие нейрональной дифференцировке и/или жизнеспособности
40. Некоторые из этих малых молекул - также как и др. подобные, такие как histone-deacetylase ингибиторы
41 и блокаторы потребления serotonin
42 - способствуют нейрогенезу в культуре клеток, а также
in vivo, со специфической модуляцией поведения при непосредственном применении. Эти исследования продемонстрировали огромную пригодность химических подходов для регуляции клеточных судеб в
in vitro. Ещё более важно, что они несут надежду на соотв. модуляцию клеточных судеб
in vitro с помощью малых молекул, что ведет к разработке терапевтических подходов в направлении регенерации
in vivo .
Reprogramming
Тканеспецифические стволовые клетки млекопитающих и клетки предшественников обычно обладают ограниченным потенциалом in vivo. Такие клетки м. дифференцироваться только в направлении тех типов клеток с более ограниченным потенциалом внутри границ одного и того же клона. Однако при определенных условиях клетки млекопитающих могут быть репрограммированы, чтобы адаптировать альтернативные клеточные судьбы вне границ клона или возвратиться к более примитивному состоянию in vitro, также как и in vivo, посредством различных механизмов. Такие техники включают перенос ядер соматических клеток (чтобы генерировать тотипотентные клетки, которые способны сформировать целый организм)43,44, клеточные (или клеточных экстрактов) слияния45,17, генетические изменения11,48,49 или определенными экзогенными молекулами10,50,51. На молекулярном уровне эти исследования показывают, что стабильно сбалансированные эпигенетические состояния могут сдвигаться при специфических воздействиях. Недавние успехи в генерации ES клеток с помощью переноса ядер соматических клеток в митотические зиготы мышей52 и в ооциты не человекообразных приматов53 подтвердили, что вполне возможно генерировать человеческие ES клетки с помощью подобного подхода, который обходит этические проблемы.
Др. прорывом в репрограммировании стала идентификация более легких генетических подходов к превращению соматических клеток обратно к iPS клеткам11,54,59 (see page 322). Простота этого генетического подхода открывает потрясающие возможности по генерации пациент-специфических клеток для разного использования (напр., для клеточной терапии или открытия лекарств) без затруднений, связанных с традиционными человеческими ES клетками. Кроме того, он облегчает исследования интригующего процесса эпигенетического обращения на полностью выверенной основе.
Практическое клиническое использование iPS-клеточных подходов в основном зависит от решения двух базовых вопросов. Первый заключается в элиминации риска, связанного с экзогенными генетическими манипуляциями, а также возможных эндогенных генетических повреждений во время медленного и неэффективного процесса репрограммирования. Второй связан с генерацией гомогенных популяций клон-специфических типов клеток из iPS клеток. Одной из стратегий является замещение генетического метода химически определенным подходом, таким как белок или РНК трансдукция и/или воздействие ростовым фактором или малой молекулой. Мы разработали два подхода для замещения вирусной трансдукции транскрипционных факторов. Первый подход служил тестовым методом, который индуцировал плюрипотентность в разных типах клеток на базе идеи, что определенные доступные типы клеток могут эндогенно экспрессировать или обладать менее замалчиваемыми локусами, некоторых из необходимых генов для индукции плюрипотентности. Т.о., клетки могут более эффективно репрограммироваться при меньших эпигенетических манипуляциях. Второй подход разработан для идентификации определенных экзогенных факторов и малых молекул, которые могут активировать сеть плюрипотентности, ингибируя негативные регуляторы плюрипотентности или прямо регулируя модификации хроматина. Оба подхода независимо или в сочетании дают позитивные результаты, которые могут в конечном итоге привести к разработке полностью химически определенной среды для генерации iPS клеток. в
Учитывая трудности с дифференцировкой плюрипотентных стволовых клеток для специфического применения, привлекательным подходм по репрограммированию является генерация непосредственно клон-специфических стволовых клеток или клеток предшественников или др. типов дифференцированных функциональных клеток путем реверсии клонов или трансдифференцировки (Fig. 3Ac). Хотя проблемы с генетическими манипуляциями (если используются), эффективностью и гетерогенностью всё ещё нуждаются в решении, эти репрограммированные клетки могут быть выгодны для дифференциации и/или обладают низким риском раковых опухолей. т.к. они клонально ограничены и не формируют тератом in vivo.
Репрограммирование соматических клеток, чтобы экспрессировать ранее молчащие гены или стать др. типом клеток, активно исследуется, создается концептуальная и техническая база для биологии эпигенетического репрограммирования. Примеры таких in vitro исследований включают индуцированное образованием гетерокариона (слияние двух разных типов клеток) репрограммирование, которое не зависит от клеточных делений60, фенотипическую конверсию определенных панкреатических клеток в гепатоциты51 с помощью обработки dexamethasone или с помощью избыточной экспрессии транскрипционного фактора C/EBP-β , превращения гепатоцитов в панкреатический фенотип за счет избыточной экспрессии61 PDX1, репрограммирования B клеток посредством делеции транскрипционного фактора Pax548,49, репрограммирование обычно ограниченных глией клеток предшественников олигодендроцитов в мультипотентные нейральные предшественники с помощью последовательного воздействия BMPs и bFGF50 и репрограммирование мезенхимных клеток путем контроля эластичности матриква62.
Для рационального скрининга малых молекул, которые м. репрограммировать клон-детерминированные клетки, чтобы превратить их в более примитивные клетки предшественники, мы осуществили базирующийся на клетках функциональный скрининг , исходя из идеи, что клон-ревертированные клетки будут получать обратно мультипотентность. Клон-специфические миобласты были скринированы с использованием двух-ступенчатого протокола скрининга, при котором клетки первоначально обрабатываются соединениями из библиотеки, чтобы индуцировать дифференцировку. Затем они проверяются относительно их способности дифференцироваться в иные не-разрешаемые остеобласты в остеогенных условиях. Синтетическая малая молекула, названная reversine, была идентифицирована и было показано, что она репрограммирует множественные клон-специфические типы клеток в более примитивное мультипотентное состояние на клональном уровне
10,63. Клеточные мишени для reversine были идентифицированы с помощью affinity chromatography как MEKl и тяжелая цепь не мышечного миозина II. Механистические исследования подтвердили, что ингибирование активности обоих белков мишеней необходимо, это влечет за собой подготовку к фазе клеточного цикла G2-M , реорганизацию цитоскелета и модуляцию передачи клеточных сигналов.
Targets for therapeutic interventions
Клеточная терапия, использующая ткане-специфические клетки, выделенные или от донора или происходящие из плюрипотентных стволовых клеток, вселяет надежду на лечение многих разрушительных болезней и повреждений. Клинический успех включает несколько клеточно-заместительных терапий, таких как трансплантации HSC при связанных с кровью нарушениях и панкреатических островков или трансплантации β клеток при type 1 диабете. Однако трудно получить донорские клетки и существуют вопросы, связанные иммунологической совместимостью и точнм контролем клеточных судеб в определенных условиях ex vivo. Как подчеркивалось выше, химические подходы д. поддерживать клеточную терапию путем генерации и/или усиления способных к трансплантации клеток за счет более лучшего контроля ex vivo клеточной жизнеспособности, роста, дифференцировки и репрограммирования. в
Учитывая, что многие ткани и органы взрослых обладают эндогенными стволовыми клетками и клетками предшественниками, которые участвуют в нормальном гомеостазе ткани и регенеративных процессах в ответ на повреждения, то вполне возможно, что собственные клетки тела может быть целенаправлено подвергнуты воздействию in vivo , чтобы улучшить регенерацию. Т.к. научное понимание биологии стволовых клеток взрослых увеличивается, то этот подход в дальнейшем будет усилен разработкой обычных лекарств. Следовательно, эндогенные стволовые клетки и клетки предшественники и их клеточные ниши являются мишенями для разработки терапевтических подходов. в
Чтобы идентифицировать новые механизмы и малые молекулы, которые могут влиять на поведение эндогенных стволовых клеток, пригодны фенотипические функциональные скрининги на клеточном и организменном уровнях. Недавний фенотипический скрининг коллекции известных лекарств на эмбрионах рыбок данио идентифицировал малые молекулы регуляторы синтеза prostaglandin E2 (PGE2) , который модулирует количества HSC in vivo64.Это открытие было в дальнейшем расширено, чтобы показать, что стабилизированный аналог PGE2, 16,16-dimethyl PGE2, улучшает восстановление почки-костный мозг после радиационного повреждения взрослых рыбок данио. Ex vivo обработка клеток костного мозга мышей 16,16-dimethyl PGE2 увеличивала частоту долговременного присутствия HSCs в костном мозге мышей после ограничивающей-dilution конкурентноспособной трансплантации64. Это указывает на то, что PGE2 действует как мощный регулятор гомеостаза HSC у позвоночных и его путь модуляции с помощью малых молекул может быть пригодным для лечения пациентов, подвергающихся трансплантации костного мозга.
Др. стратегия для развития малых молекул для регенерации является фокусированием на определенных молекулярных мишенях или путях. таких как WNT- и hedgehog-обеспечиваемая передача сигналов, которые участвуют в специфических регенеративных процессах. Одной из потенциальных возможностей при активации регенеративного пути является риск возникновения рака, т.к. определенные генетические альтерации или аномальная генная экспрессия, которая ведет к активации некоторых из таких путей, ассоциированы с раком. Стратегии, такие как временная и/или синергичная активация могут дать приемлемое решение. Чтобы идентифицировать новые соединения и пути, которые взаимодействуют с каноническим WNT-β-catenin сигнальным путем, мы недавно осуществили базирующийся на репортере высокопродуктивный скрининг молекул, которые синергично активируют репортер в присутствии WNT3A. 2,6,9-trisubstituted purine соединение, QS11, как было установлено действует синергично с каноническими WNT белками как in vitro, так и in vivo65. Affinity chromatography идентифицировала ARF-GAP в качестве мишени для QS11. Дополнительные биохимические. генетические и функциональные исследования показали, что QS11 ингибирует ARF-GAP и вследствие этого модулирует активность ARF и локализацию β-catenin так, что это вызывает взаимные влияния с WNT-обеспечиваемой передачей сигналов. в
Существенны успехи достигнуты в определении ниш стволовых клеток взрослых и в понимании того, как они регулируют функцию стволовых клеток
in vivo , они создают новые стратегии для контроля клеточных судеб с помощью фармакологического воздействия на ниши
5 (Fig. 3Ae). Такие подходы сами по себе или в комбинации с подходами по воздействию на стволовые клетки непосредственно предоставляют широкий выбор молекулярных мишеней или выявляют более устойчивые реакции при специфических воздействиях. На мышах было показано, что ежедневное воздействие паратироидным гормоном, которое увеличивает количество остеобластов, ключевым компонентом ниш HSC, приводит к экспансии и защите HSCs с терапевтической пользой в трех клинически важных моделях базирующейстя на стволовых клетках терапии
66. В др. примере, регенерация поврежденных аксонов в ЦНС взрослых ограничивалась как с помощью прирожденной некомпетентности, так и микроусловий, состоящих из миэлина и глиального рубца. Скрининг малых молекул, которые могли бы нейтрализовать ингибирующую активность, такую как ассоциированный с ЦНС myelin, идентифицировал ингибиторы EGFR в качестве мощных промоторов роста нейритов гранулярных нейронов мозжечка на неподвижном миэлиновом субстрате
67. Более важно, что локальное применение, ингибиторов EGFR ведет к достоверной регенерации волокон поврежденного оптического нерва у мышей, подтверждая тем самым, что целенаправленное воздействие ингибирующих микроусловий может представлять терапевтический путь для улучшения регенерации аксонов после повреждений ЦНС.
Perspectives
Stem cells present enormous opportunities for basic research, drug discovery and therapies. Conventional small-molecule or biological therapeutics will probably become a more convenient form of regenerative medicine, working to unleash the body's own regenerative capacities by promoting survival, migration, proliferation, differentiation or reprogramming of endogenous cells. в
Continued development and application of chemical approaches in stem cells will undoubtedly lead to identification of additional small molecules and more precisely defined and 'individualized' conditions for controlling cell fate in vitro and in vivo. ¦
Сайт создан в системе
uCoz
