Посещений:
ПРОТЕОСОМЫ: СБОРКА

Роль Шаперонов




ORIGINAL RESEARCH PAPERS

Funakoshi, M. et al.br/> Multiple assembly chaperones govern biogenesis of the proteasome regulatory particle base. Cell 137, 887–899 (2009)
Article

Saeki, Y. et al.
Multiple proteasome-interacting proteins assist the assembly of the yeast 19S regulatory particle.
Cell 137, 900–913 (2009)
Article

Roelofs, J. et al.
Chaperone-mediated pathway of proteasome regulatory particle assembly.
Nature 459, 861–865 (2009)
Article

Kaneko, T. et al.
Assembly pathway of the mammalian proteasome base subcomplex is mediated by multiple specific chaperones.
Cell 137, 914–925 (2009)
Article

Park, S. et al.
Hexameric assembly of the proteasomal ATPases is templated through their C termini.
Nature 459, 866–870 (2009)
Article

FURTHER READING

Murata, S. et al.
Molecular mechanisms of proteasome assembly.
Nature Rev. Mol. Cell Biol. 10, 104–115 (2009)
Article
Протеосомы 26S представлены 20S протеолитической core particle (CP) и 19S regulatory particle (RP), которая состоит из lid субкомплекса и базового субкомплекса. В то время как механизмы, лежащие в основе сборки CP хорошо известны, мало известно о том, как формируются RP. Несколько групп сообщают, что сборка RP у дрожжей и млекопитающих нуждается в множественных шаперонах, которые облегчают формирование специфических предварительных сборок , которые затем собираются в виде основы протеосом и в RP.
Масс-спектрометрический анализ иммуноочищенных протеосомных комплексов от почкующихся дрожжей, проведенный Funakoshi, Saeki, Roelofs с коллегами, выявил четыре proteasome-interacting proteins (PIPs) - Nas6 (gankyrin или p28 у млекопитающих), Rpn14 (PAAF1 у млекопитающих), Hsm3 (S5B у млекопитающих) и, в первых двух исследованиях, Nas2 (p27 у млекопитающих). Эти PIPs соединяются специфически со свободными RP или RP базовыми субкомплексами, но отсутствуют в зрелых 26S протеосомах. Каждый из этих белков соединяется с определенной субъединицей основы, это указывает на то, что они могут быть base-специфическими шаперонами.
Фенотипический анализ разных мутантных линий показывает, что PIPs выполняют перекрывающиеся роли в функционировании 26S протеосом и три группы показали, что двойные, тройные и четверные мутанты дефектны по сборке 26S протеосом in vivo. Избыток свободных lid, CP и base субкомплексов выявлен в специфических множественных мутантных линиях, но RP и полные 26S протеосомы были истощены. Это указывает на дефекты сборки основания и подтверждает, что PIPs являются base-специфическими шаперонами.
Группы далее показали, что каждый шаперон формирует специфические предварительные ансамбли (subassemblies), как показывает native gels и mass spectrometry анализ и что эти субансамбли, по-видимому, ассоциируют упорядоченным образом, чтобы сформировать базовый субкомплекс. Сходные находки описаны Kaneko et al., которые изучали сборку базовых субкомплексов у млекопитающих. Итак, была продемонстрирована удивительная эволюционная консервация пути сборки.
Как же сборка базового субкомплекса связана со сборкой RP и 26S протеосом? Base-специфические шапероны присоединяются вблизи С-терминаьных доменов специфических базовых субъединиц. Эти субъединицы, Rpt1-6, формируют ATФазное кольцо на CP с её C окончаниями, вставляемыми в связывающие карманы в CP. Park et al. показали, что мутанты, которые лишены C-терминальных остатков Rpt субъединиц, накапливают свободные CP и свободные lid, как и в случае мутантов шаперонов. Эти и др. находки показали, что сборка основания зависит от взаимодействия с CP. Механическая связь между шаперонами и С окончаниями Rpt субъединиц показана Roelofs et al., которые показали, что base-специфические шапероны могут ограничивать доступ Rpt C окончаний к CP и что конкуренция между CP и шаперонами может объяснить высвобождение шаперонов из зрелых 26S протеосом.
Сайт создан в системе uCoz