Нейроны являются поляризованными клетками, которые испускают одиночный аксон и несколько дендритов. Обычно исследуются диссоциированные клетки гиппокампа в культуре. Эти клетки сразу после помещения, выпускают ламеллиподии, которые затем развиваются в несколько коротких незрелых нейрита (Dotti et al. 1988). После периода нейритов попеременно удлиняющихся и отдергивающихся назад один из этих нейритов приобретает аксональную природу. После этого момента ни один из оставшихся отростков не может стать аксоном. Эти находки указывают на то, что полярность аксон-дендрит прирожденно регулируется так, что "победитель" среди эквивалентных ранних отростков становится аксоном (reviewed in Bradke & Dotti 2000). Базируясь на этих наблюдениях, ряд исследований был посвящен молекулярным механизмам, лежащим в основе этого процесса, идентификации роли некоторых молекул (rev. Arimura & Kaibuchi 2007; Barnes & Polleux 2009; Bradke & Dotti 2000), также была предложена количественная математическая модель (Inagaki et al. 2011). Однако эти механизмы были поставлены под вопрос, поскольку процедура диссоциации удаляет все существующие отростки и нейроны испытывают повторное удлинение отростков в искусственно созданных неполяризованных условиях. Более того, поскольку нейроэпителиальные клетки, которые дают нейроны поляризованы апико-базально, то нейроны, которые возникают из таких клеток могут сохранять эту полярность in vivo во время инициации аксона.

Необходимы прямые наблюдения процессов инициации аксонов in vivo. Недавний прогресс наблюдений вживую сделал возможным такие наблюдения in vivo или в in vivo-подобных препаратах, проливая свет на фундаментальный, но давно требующий ответа вопрос, как нейроны устанавливают полярность аксон-дендриты.

Emergence of axons from polarized cells

Ряд исследований развивающихся нейронов in situ позволил предположить, что аксоны возникают из поляризованных незрелых нейронов. Это и аксоны в сетчатке мышей и рыбок данио (Hinds & Hinds 1974; Morgan et al. 2006; Zolessi et al., 2010), в спинном мозге мышей и кур (Wentworth & Hinds 1978; Wilcock et al. 2007) и в зрительном tectum кур (Martнnez et al. 1992).

Возникновение аксонов из клеток ретинальных ганглиев (retinal ganglion cells (RGCs)) исследовалось активно, Напр., ЭМ наблюдения серийных тонких срезов показали, что аксональные выпячивания из RGCs происходят из базальных отростков, которые контактируют с внутренней ограничивающей мембраной нейроэпителия (Hinds & Hinds 1974). Это было подтверждено получением изображений в реальном времени RGCs рыбок данио in vivo (Zolessi et al., 2010), это продемонстрировало, что аксон-подобный отросток возникает на базальной стороне радиально ориентированных биполярной формы незрелых нейронов. Randlett et al. (2011) подтвердили аксональную природу этих отростков, используя yellow fluorescent protein (YFP)-нагруженный постоянно активный моторный домен Kinesin 1 (Kif5c560-YFP), который избирательно накапливается в аксонах (Nakata & Hirokawa 2003; Jacobson et al. 2006; Konishi & Setou 2009), демонстрируя, что Kif5c560-YFP сигнал перемещается в кончик базального отростка в очень молодых RGCs и, наконец, в ростовой конус аксона. Эти находки указывают, что аксоны RGCs возникают из поляризованных клеток (Fig. 1A).

Сходные результаты были получены для аксоногенеза из биполярных клеток сетчатки мышей (Morgan et al. 2006). Биполярные клетки сетчатки являются промежуточными нейронами, которые воспринимают сигналы от фоторецепторов, образуют синапсы с клетками ретинальных ганглиев и амакринными клетками и последние нейроны дифференцируются в сетчатку (Cepko et al. 1996). Golgi исследования сетчатки эмбрионов кур показали, что апикальные подобные нейроэпителиальному отростки являются источником их дендритов (Quesada & Gйnis-Gбlvez 1985). Более того, недавнее исследование с использованием линии трансгенных мышей, экспрессирующих enhanced green fluorescent protein (EGFP) в субнаборе биполярных клеток сетчатки, продемонстрировало, что их аксоны и дендриты возникают из подобных нейроэпителиальным отростков (Morgan et al. 2006). Сравнение фиксированных образцов разных возрастов и эксперименты с получением изображений в реальном времени показали, что базальные отростки, оттягивающиеся назад от внутренней ограничивающей мембраны, начинают формировать боковые выпячивания на базальном отростке, тогда как апикальные отростки начинают ветвиться внутри их targeting слоёв перед потерей их соединений с наружной ограничивающей мембраной. С увеличением возраста оставшиеся базальным и апикальными отростки стратифицируются внутри соотв. синаптических слоев и дифференцируются в аксоны и дендриты, соотв. Эти находки указывают на то, что биполярные клетки сетчатки устанавливают свою аксон-дендрит полярность путем наследования подобного нейроэпителиальному отростка.

Transformation of the leading (trailing) process into the axon

Развивающиеся нейроны мигрируют от своего места возникновения в место финального предназначения. Во время миграции нейроны обладают поляризованной формой за счет выпячивания ведущего отростка вперед и подтаскиваемого отростка позади. Для некоторых из таких нейронов или ведущий или подтягиваемый отросток превращаются в аксон (Rakic 1971; Komuro et al. 2001; Watanabe & Murakami 2009; Miyata et al. 2010).

Предмозжечковые нейроны в заднем мозге возникают в нижней ромбической губе в дорсальном кармане нервной трубки, мигрируют тангенциально ниже мягкой мозговой поверхности и в конечном счете формируют предмозжечковые ядра (Kawauchi et al. 2006). Среди них наиболее интенсивно изучали миграцию нейронов, предназначенных стать нейронами ядра варолиева моста (Kawauchi et al. 2006; Watanabe & Murakami 2009). Эти нейроны проецируют длинные аксоны по направлению к ипсилатеральной или контралатеральной стороне мозжечка, чтобы стать мшистыми (mossy) волокнами. Во время тангенциальной миграции они выпускают длинные ведущие отростки. Когда они достигают места окончательного предназначения, то клеточные тела прекращают тангенциальную миграцию и инициируют радиальную миграцию (Watanabe & Murakami 2009). Поскольку оттягивания назад тангенциально ориентированных ведущих отростков никогда не наблюдалось, то наиболее вероятным сценарием является тот, согласно которому подтягиваемый отросток, который первоначально был ведущим отростком, становится аксоном (Fig. 1B).

Гранулярные клетки мозжечка выпускают свои аксоны в направлении молекулярного слоя в коре мозжечка, где они раздваиваются T-образным способом и идут параллельно продольной оси folium, чтобы сформировать параллельные волокна. Поляризация гранулярных клеток мозжечка, как было охарактеризовано Golgi и ЭМ исследованиями (Rakic 1971) и экспериментами по получению изображений в реальном времени тонкослойных препаратов мозжечка мыши (Komuro et al. 2001), подтвердило, что ведущий и подтягиваемый отростки этих клеток превращаются в аксон. После своего финального митоза в наружном гранулярном слое предшественников, которые мигрируют тангенциально от верхней ромбической губы, гранулярные клетки мозжечка принимают биполярную форму и мигрируют тенгенциально, выпуская ведущий и подтягиваемый отростки. На обращенной др. к др. стороне между наружным гранулярным слоем и молекулярным слоем гранулярные клетки обнаруживают трехполюсную форму за счет выпячивания радиально ориентированного отростка в молекулярный слой, который становится новым ведущим отростком. Как только появляется радиально ориентированный ведущий отросток, гранулярные клетки мигрируют радиально во внутренний гранулярный слой, позволяя T-образному подтягиваемому отростку в конечном счете формировать характерные T-образные аксоны (Fig. 1C).

Недавнее исследование клеток Пуркинье показало, что их ведущие отростки превращаются в аксоны. Клетки Пуркинье возникают в вентрикулярной зоне (VZ), которая обращена в четвертый желудочек (Hoshino et al. 2005; Mizuhara et al. 2010), и мигрирует в направлении стороны мягкой мозговой оболочки зачатка мозжечка. чтобы сформировать слой клеток Пуркинье (Miale & Sidman 1961; Yuasa et al. 1991). Miyata с коллегами исследовали аксоногенез клеток Пуркинье с использованием метода переноса генов посредством аденовируса в комбинации с иммуногистохимией и получением изображений в реальном времени (Miyata et al. 2010). Формируемые клетки Пуркинье обнаруживают простые моно- и биполярные формы, распространяя тонкие и длинные ведущие отростки от своих тел, которые ориентированы радиально или тангенциально. В некоторых нейронах ведущие отростки искривлены, принимая первоначально радиальную ориентацию, а затем меняя её на тангенциальную. Иммуноокрашивание нейрофиламент и маркеры клеток Пуркинье показали, что радиально и тангенциально ориентированные neurofilament-позитивные волокна принадлежат к формируемым клеткам Пуркинье, указывая тем самым, что радиально и тангенциально ориентированные ведущие отростки превращаются в аксоны.

Axon formation from multipolar cells

В двух недавних исследованиях, которые анализировали формирование аксонов из кортикальных ингибирующих интернейронов и возбуждающих нейронов у мышей, выявили третий тип образования аксонов, а именно, инициацию аксонов из мультиполярных форм (Yamasaki et al. 2010; Hatanaka & Yamauchi 2012). Этот тип отличается от примеров, приведенных выше тем, что инициация аксонов, по-видимому, происходит из неполяризованных клеток (Fig. 1D,E: red cells).

Cortical inhibitory interneurons

Кортикальные ингибирующие промежуточные нейроны генерируются в subpallium (Anderson et al. 1997, 2001; Tamamaki et al. 1997; Nery et al. 2002; Yozu et al. 2005; Kanatani et al. 2008; Miyoshi et al. 2010) и затем мигрируют в кортекс (Nadarajah et al. 2002; Tanaka et al. 2003; Mйtin et al. 2006). Здесь они достигают маргинальной зоны (MZ) и осуществляют многонаправленную тангенциальную миграцию, которая рассеивает из по всему кортексу (Tanaka et al. 2006, 2009, 2010). Постнатально эти нейроны оказывают в своей финальной позиции (Hevner et al. 2004; Bortone & Polleux 2009; Tanaka et al. 2009).

Мы недавно исследовали инициацию аксонов этих нейронах на фиксированных препаратах и с помощью получения изображений в реальном времени (Yamasaki et al. 2010). Интернейроны, меченные in utero с помощью электропортации на день эмбриогенеза (E) 12.5, обнаруживали миграцию в направлении кортикальной пластинки (CP) во время ранних постнатальных стадий. В это же время они приобретали заметные изменения в морфологии, от простой монополярной в биполярную форму с более сложной морфологией со множественными веточками (Fig. 2A-D). На ст. E18.5, большинство нейронов обнаруживает простую биполярную морфологию, удлиненный ведущий отросток (Fig. 2A). На постнатальный день (P) 2.5, они вытягивают множество длинных веточек, иногда обнаруживая мультиполярую форму (Fig. 2D). Отличительным свойством было появление очень длинного отростка (более 200 µm) (Fig. 2D,E). Кроме того, пропорция меченных клеток, которые обладают отростками длиной, превосходящей 200 µm, внезапно увеличивалась на ст. P1.5 (Fig. 2F). Итак, эти находки подтверждают, что трансформация кортикальных ингибирующих интернейронов из мигрирующих клеток в стационарные зрелые клетки, которые выпускают аксоны, происходит на ранних постнатальных стадиях.

Для непосредственного наблюдения морфологической трансформации из мигрирующих в стационарные зрелые нейроны мы проводили наблюдение в реальном времени, начиная c E18.5 или P0.5. Большинство меченных клеток в CP обнаруживает мультиполярную сходную с морским ежом морфологию и попеременно выпускает и отдергивает множество коротких отростков (Fig. 3). Один отросток из такой мультиполярной клетки неожиданно начинает удлиняться. Отросток продолжает удлиняться во время наблюдаемого периода, тогда как все остальные нет. Тонкая длинная морфология одиночного удлиняющегося отростка вместе с отличительным поведением др. отростков, которые продолжают выпячиваться и втягиваться, указывает на то, что удлиняющийся отросток является проспективным аксоном. Аксональная природа этого отростка подтверждена тщательной проверкой не только онтогенетических изменений в морфологии, но и также длиной (более 200 µm) и динамикой аксонального роста. Наши наблюдения, что эти нейроны не мигрируют активно во время выпячивания длинного отростка, делает маловероятным, чо эти нейроны инициируют свои аксоны после приобретения новой полярности путем образования ведущих отростков. Эти результаты подтверждают, что кортикальные ингибирующие промежуточные нейроны инициируют свои аксоны в неполяризованных клетках.

Cortical excitatory neurons

Кортикальные возбуждающие нейроны происходят из кортикальной VZ и мигрируют радиально в направлении поверхности мягкой оболочек. Гистологические исследования и наблюдения в реальном времени показали, что во время миграции эти нейроны меняют свою морфологию в соответствии с их положением: из формы, подобной радиальной глии, в VZ в мультиполярную форму в subventricular/intermediate zone (SVZ/IZ) и в конечном итоге в биполярную форму в верхней части IZ или кортикальной пластинке (Derer 1974; Shoukimas & Hinds 1978; Noctor et al. 2001, 2004; Tamamaki et al. 2001; Tabata & Nakajima 2003; Hatanaka et al. 2004; Miyata et al. 2004). В верхней части кортикальной стенки эти нейроны биполярной формы, по-видимому, обладают проспективным аксоном в качестве перемещаемого отростка (Hatanaka & Murakami 2002). Исследования Golgi и ЭМ анализ серии тонких срезов показал, что длинный тонкий отросток исходит их IZ клеток, несущих множественные короткие отростки (Stensaas 1967; Shoukimas & Hinds 1978), возникает возможность, что кортикальные возбуждающие нейроны могут также инициировать аксон из мультиполярных клеток. Недавно, Noctor с коллегами предоставили доказательства, что аксоно-подобный отросток удлиняется из без сомнения мультиполярных клеток на кортикальных срезах (Noctor et al. 2004). Однако точные морфологические изменения, связанные с образованием аксонов в мультиполярных клетках, не наблюдали. Поэтому мы непосредственно проверяли эту идею с помощью получения изображений в реальном времени (Hatanaka & Yamauchi 2012). Кортикальные VZ клетки были мечены с помощью in utero электропортации cre-индуцибельных закрепленных на мембранах EGFP- and Cre-плазмид на ст. E12.5. Т.к. низкие концентрации Cre плазмид давали редкие меченные клетки, содержащие cre-индуцибельные репортерные плазмиды, поэтому мы были способны исследовать тонкую морфологию потомства каждой меченной VZ-клетки. Мы сначала готовили кортикальные коронарные срезы спустя 32 ч после электропортации, это время, в течение которого большинство меченного потомства в IZ обнаруживало только множественные короткие отростки. Морфологические изменения этих IZ клеток исследовали в течение 40 ч в культуре. Как сообщалось ранее, IZ клетки первоначально обнаруживали "multipolar migration" (Tabata & Nakajima 2003), динамически выпуская и втягивая множественные короткие отростки в то время как тело медленно перемещалось и не обнаруживали фиксированной клеточной полярности (Fig. 4A). Спустя несколько часов новый растущий отросток внезапно начинал удлиняться тангенциально (Fig. 4B). Он обычно продолжал удлиняться в течение всего периода наблюдения до тех пор, пока не становился единственным выдающимся отростком, указывая, что тангенциальные отросток соответствует проспективному аксону.

Типичные возбуждающие кортикальные нейроны испускают свои аксоны из дна тела клетки в направлении белого вещества, где эти аксоны поворачиваются перпендикулярно, чтобы дать восходящие или нисходящие проекции. Следовательно, если приведенная выше интерпретация правильна, то отросток д. обнаруживать "L-образную" траекторию, будучи исследован на более поздних стадиях развития. Для проверки этого мы приготовляли кортикальные срезы спустя 37-38 ч. после электропортации. Многие из меченных IZ клеток имели уже довольно длинный отросток тангенциальный в начале наблюдаемого периода. Затем они устанавливали отросток, направленный к мягкой оболочке, и начинали мигрировать радиально. Поскольку радиальная миграция сопровождается существенным удлинением тангенциального отростка, то такое динамическое поведение в конечном счете дает ожидаемый "L-образный" рисунок проекции, указывая, что эти тангенциальные отростки действительно становятся аксонами этих нейронов. Аксональная природа тангенциальных отростков была в дальнейшем подтверждена наблюдениями, что Kif5c560-EGFP накапливается в кончике отростка. Эти результаты указывают, что образование аксонов в кортикальных возбуждающих нейронах из неполяризованных клеток, морфологически сходно с таковыми в мультиполярных подобных морским ежам клетках.

Итак, эти наблюдения указывают на то, что инициация аксонов из кортикальных нейронов грызунов может происходить в мультиполярных клетках in situ. Интересно, что эти находки согласуются с предыдущими наблюдениями in vitro инициации аксонов из диссоциированных нейронов гиппокампа (Dotti et al. 1988).

A model for the establishment of axon-dendrite polarity in vivo

Может наблюдаться три разных типа формирования аксонов: образование аксонов из поляризованной клетки, образование из мультиполярной клетки и возникновение аксонов путем трансформации ведущего и/или ведомого отростка мигрирующих нейронов. Каковы причины различий в способе инициации аксонов этих трех типов? Мы полагаем, что в зависимости от того, поляризованы нейроны или нет на стадии образования аксона детерминируется и способ становления полярности аксон-дендрит: нейроэпителиальные клетки дают или поляризованные или неполяризованные незрелые предшественники нейронов (Fig. 5A,B,D); если незрелые нейроны предшественники поляризованы на стадии инициации аксона (Fig. 5B), то полярность будет наследоваться (Fig. 5C); если они не поляризованы, то будут иметь мультиполярную форму (Fig. 5D), из которой полярность аксон-дендрит устанавливается de novo (Fig. 5E). Генерация и поддержание полярности в предшественниках нуждается в активации прирожденных и внешних факторов поляризации. Если эти факторы не активированы, то предшественники теряет свою полярность и трансформируется в мультиполярную форму.

Нейроны такие как клетки ретинальных ганглиев, нейроны ядра варолиева моста и гранулярные клетки мозжечка (Fig. 1A-C) могут проходить по пути, представленному на Рис. 5A?B?C, хотя существует изменчивость в степени миграции, которая предшествует инициации аксонов. Кортикальные ингибирующие интернейроны (Fig. 1D) могут использовать путь, представленный на Рис. 5A?B?D?E, тогда как кортикальные возбуждающие нейроны (Fig. 1E) скорее всего могут идти по пути, представленному на Рис. 5A?D?E.

Possible factors that may affect the mode of axon initiation

Neurons from neuroepithelial cells versus from intermediate progenitors

Одним из возможных факторов, которые могут влиять на поляризацию незрелых нейронов предшественников, может быть история развития генерации нейронов. Несколько типов незрелых нейронов, включая RGCs, биполярные клетки сетчатки и клетки Пуркинье, по-видимому, сохраняют апикально-базальную полярность, когда они дифференцируются из поляризованных нейроэпителиальных клеток. RGCs, напр., генерируются непосредственно из нейроэпителиальных клеток (Zolessi et al., 2010). Эти клетки содержат апикальные компоненты в своем апикальном отростке во время аксоногенеза (Zolessi et al., 2010). Напротив, кортикальные ингибирующие интернейроны (Brown et al. 2011) и возбуждающие нейроны (Miyata et al. 2004; Noctor et al. 2004), которые формируют аксоны из мультиполярных клеток, генерируются, по крайней мере, частично из предшественников промежуточных нейронов. Т.о., для этих нейронов апикально-базальная полярность может быть потеряна, когда образуются предшественники промежуточных нейронов из предшественников или нейроны из предшественников промежуточных нейронов, приводя к мультиполярной форме. В подтверждение этой идеи некоторые RGC клетки принимают мультиполярную форму у мутантов, у которые нарушена апикально-базальная полярность нейроэпителия сетчатки (Zolessi et al., 2010).

External cues

Внешние сигналы также д. влиять на способ инициации аксонов. RGCs, которые испускают аксоны с базальной стороны незрелых поляризованных нейронов in vivo, временно обнаруживают мультиполярные формы в диссоциированных культурах (Zolessi et al., 2010; Randlett et al. 2011) подобные клеткам гиппокампа (Dotti et al. 1988). Эти нейроны также приобретают мультиполярную форму in vivo когда базовый белок ламины Laminin 1 is удаляется с помощью антисмыслового morpholino (Randlett et al. 2011). Эти наблюдения открывают возможность, что незрелые RGCs теряют свою полярность, чтобы приобрести мультиполярную форму прежде, чем они начнут инициировать аксональное выпячивание в отсутствие внешних сигналов. Поразительно, сходный феномен может наблюдаться для специфических для гермафродитов моторных нейронов (HSN) у Caenorhabditis elegans (C. elegans). Эти нейроны экспрессируют UNC-40/DCC рецепторы, которые наводят аксоны в направлении UNC-6/netrin в вентральной части нервного ствола (Hedgecock et al. 1990). Во время развития они формируют вентрально направленный ведущий край от своих клеточных тел и затем испускают множественные, но вентрально направленные отростки, направляя в конечном счете и аксон вентрально скорее, чем кпереди. У unc-6 и unc-40 мутантов незрелые HSN нейроны неспособны формировать ведущий край и приобретать мультиполярную форму и в конечном счете испускают аксон, направленный кпереди, тогда как индуцированная тепловым воздействием экспрессия UNC-6 у unc-6 мутантов индуцирует образование поляризованного ведущего края в незрелых HSN нейронах (Adler et al. 2006). Эти наблюдения подтверждают, что внешние сигналы могут контролировать поляризацию незрелых предшественников, которая в свою очередь управляет способом инициации аксона.

Motility of migrating neurons

Как описано выше, очевидно, что полярность аксон-дендрит происходит из поляризованных структур мигрирующих нейронов. Однако, поскольку кортикальные ингибирующие интернейроны активно мигрируют во время эмбрионального развития, то они обладают неполяризованной формой во время инициации аксона, указывая тем самым, что вряд ли эти нейроны наследуют полярность мигрирующих нейронов. Тот факт, что эти нейроны становятся почти стационарными, когда они обладают неполяризованной формой (Yamasaki et al. 2010) открывает возможность, что подавление подвижности ведет к потере их полярности в качестве мигрирующих нейронов.

Dominance of intrinsic polarization factors

Определенные типы нейронов, по-видимому, обладают сильным прирожденным механизмом. который позволяет им устанавливать поляризованную форму независимо от истории их развития или внешних сигналов. Гранулярные клетки мозжечка становятся постмитотическими в наружном гранулярном слое посредством промежуточных предшественников (Miale & Sidman 1961), процесса, который, как ожидается, инактивирует поляризацию незрелых нейронов. Однако эти клетки инициируют свои аксоны из биполярной формы без прохождения стадии ранней мультиполярной формы (see above). Поразительно аксоны гранулярных клеток мозжечка возникают из биполярных клеток даже в культуре диссоциированных клеток, где вряд ли действуют внешние поляризующие сигналы (Powell et al. 1997). Эти находки указывают на то, что гранулярные клетки мозжечка обладают сильной поляризующей способностью, которая превосходит силы инактивации полярности аксон-дендрит.

Future perspective

Although axon-dendrite polarity formation has long been studied, dynamic events of axon initiation have been mostly demonstrated using dissociated culture. While careful examination of the morphological transition between neural progenitors and postmitotic neurons in fixed samples led to an idea that neurons can inherit their axon-dendrite polarity from the apico-basal polarity of their progenitors (Polleux & Snider 2010), studies using live imaging have revealed that transformation from the leading and/or trailing process and de novo axon formations from multipolar cells as novel types of axon-dendrite polarization.

Molecular mechanisms underlying axon-dendrite polarization have been studied extensively during past decades (Arimura & Kaibuchi 2007; Barnes & Polleux 2009), resulting in several molecules such as CRMP2, the PAR3/PAR6 complex, LKB1, SAD kinases, Shootin 1 and UNC-6/netrin being identified as important regulators. Because most of these studies used the model of dissociated cultures, their roles in vivo have remained obscure. However, now that the axon-dendrite polarity also emerges from multipolar cells or from polarized immature neurons in situ, this issue can be explored more comprehensively.

Yet even though the formation of axon-dendrite polarity in situ appears to depend on whether immature predecessor neurons are polarized or not, the molecular nature of polarization factors still remain unclear. Therefore, further studies are required to test our model and reveal the molecular nature of polarization factors and their regulation.

Formation of Axon-dendrite polarity in situ: Initiation of axons from polarized and non-polarized cellsYumiko Hatanaka, Kenta Yamauchi, Fujio Murakam Development, Growth & Differentiation Special Issue: Neural Development Edited by T. Miyata. Volume 54, Issue 3, pages 398–407, April 2012

Formation of Axon-dendrite polarity in situ: Initiation of axons from polarized and non-polarized cells
Yumiko Hatanaka, Kenta Yamauchi, Fujio Murakam
Development, Growth & Differentiation Special Issue: Neural Development Edited by T. Miyata. Volume 54, Issue 3, pages 398–407, April 2012