Посещений:
Raft with Ebola VP40

Прижизненная визуализация Ebola белка VP40 локализует его в липидных платформах (rafts) мембран.

H. Garoff et al., “Virus maturation by budding,” Microbiology and Molecular Biology Reviews, 62:1171-1190, December 1998.
[PubMed Abstract]  

S. Bavari et al., “Lipid raft microdomains: a gateway for compartmentalized trafficking of Ebola and Marburg viruses,” Journal of Experimental Medicine, 195:593-602, March 4, 2002.
[PubMed Abstract]  

R.G. Panchal et al., “In vivo oligomerization and raft localization of Ebola virus protein, VP40, during vesicular budding,” PNAS, DOI:10.1073/pnas.2533915100, December 1, 2003.
http://www.pnas.org/ 

National Cancer Institute
http://cancer.gov/ 

B.A. Griffin et al., “Fluorescent labeling of recombinant proteins in living cells with FlAsH,” Methods in Enzymology, 327:565-578, 2000.
[PubMed Abstract]
Вирус Ebola м. вызывать тяжёлую гемморагическую лихорадку и является серьёзной угрозой для людей. Предыдущие исследования были направлены на изучение компонентов, участвующих в его сборке и отпочковывании, таких как Ebola glycoprotein (GP) и matrix protein VP40. Недавно было показано, что Ebola glycoprotein (GP) находится в обогащенных холестеролом detergent membrane (DRM) доменах внутри плазматической мембраны (lipid rafts). В работе PNAS, Rekha G. Panchal и др. из National Cancer Institute получено изображение Ebola белка VP40 в живых клетках и показано, что он образует олигомеры, которые располагаются в липидных платформах (PNAS, DOI:10.1073/pnas.2533915100, December 1, 2003).
Panchal et al. анализировали VP40 с помощью Western blotting, с и без кипечения белковых выборок и обнаружили, что VP40 образует олигомеры в клетках. Эти VP40 олигомеры ассоциированы только с мембранами, особенно в фракцией липидных платформ, следовательно эта ассоциация является ключевой для олигомеризации VP40.
Авт. затем получили ряд мутантов VP40 и проанализировали их локализацию в живых клетках, используя biarsenic compound FIAsH, соединение, которое флюоресцирует зеленым, если соединяется с генетически преобразованным (engineered) белковым мотивом (TC motif). Преобразованный TC-VP40 белок локализовался в липидных платформах в живых клетках, а укорочение 18 С-терминальных остатков полностью устраняло такое связывание. Этот С-терминальный мутант вместо этого агрегирует в цитоплазме, указывая тем самым на "a direct correlation between membrane and possibly raft localization of VP40 and its ability to bud from the cells."
Сайт создан в системе uCoz