Инфекция вируса гепатита В (HBV) остается важной проблемой глобального общественного здравоохранения. Хотя современная противовирусная терапия значительно снизила смертность и заболеваемость хроническим гепатитом В (CHB), она не может его вылечить. После прекращения противовирусной терапии часто возникает повторная виремия. Сохраняющаяся covalently closed circular DNA (cccDNA) и интегрированная ДНК в условиях противовирусной терапии образуют основное препятствие для искоренения инфекции HBV. CRISPR-опосредованное редактирование генома стало перспективным терапевтическим подходом для специфического уничтожения персистирующих геномов HBV, как cccDNA, так и интегрированной ДНК, для излечения HBV. Однако разрезание интегрированной ДНК HBV с помощью CRISPR-Cas9 приводит к двунитевому разрыву (DSB) генома хозяина, что вызывает серьезные опасения по поводу нестабильности генома и канцерогенеза. Недавно разработанные CRISPR-редакторы оснований (BEs), которые объединяют каталитически недействующую нуклеазу с ферментом деаминазы, находящимся в ядре, могут быть использованы для постоянной инактивации генома HBV путем введения необратимых точечных мутаций для генерации преждевременных стоп-кодонов без DSBs в геноме хозяина. Несмотря на перспективность, CRISPR-опосредованное редактирование оснований все еще сталкивается с серьезными проблемами перед клиническим применением, включая эффективность редактирования оснований, внецелевой эффект, сложность поиска консервативных целевых последовательностей HBV и эффективность доставки in vivo. Было принято несколько стратегий для оптимизации эффективности и специфичности CRISPR-BEs и повышения эффективности доставки in vivo с помощью новых вирусных и невирусных подходов к доставке. В частности, невирусная доставка мРНК Cas9 и рибонуклеопротеина с помощью липидных наночастиц демонстрирует привлекательный потенциал для клинической доставки в печень. Наряду со всеми вышеперечисленными достижениями, CRISPR-опосредованная генотерапия в конечном итоге приведет к излечению от HBV.

The potential and challenges of CRISPR-Cas in eradication of hepatitis B virus covalently closed circular DNA. Yang HC, Chen PJ. Virus Res. 2018 Jan 15;244:304-310. doi: 10.1016/j.virusres.2017.06.010. Epub 2017 Jun 13. PMID: 28627393 Review.

Permanent Inactivation of HBV Genomes by CRISPR/Cas9-Mediated Non-cleavage Base Editing. Yang YC, Chen YH, Kao JH, Ching C, Liu IJ, Wang CC, Tsai CH, Wu FY, Liu CJ, Chen PJ, Chen DS, Yang HC. Mol Ther Nucleic Acids. 2020 Jun 5;20:480-490. doi: 10.1016/j.omtn.2020.03.005. Epub 2020 Mar 19. PMID: 32278307 Free PMC article.

Complete Spectrum of CRISPR/Cas9-induced Mutations on HBV cccDNA. Seeger C, Sohn JA. Mol Ther. 2016 Aug;24(7):1258-66. doi: 10.1038/mt.2016.94. Epub 2016 May 16. PMID: 27203444 Free PMC article.

Orthologous CRISPR/Cas9 systems for specific and efficient degradation of covalently closed circular DNA of hepatitis B virus. Kostyushev D, Brezgin S, Kostyusheva A, Zarifyan D, Goptar I, Chulanov V. Cell Mol Life Sci. 2019 May;76(9):1779-1794. doi: 10.1007/s00018-019-03021-8. Epub 2019 Jan 23. PMID: 30673820

CRISPR/Cas9-based tools for targeted genome editing and replication control of HBV. Peng C, Lu M, Yang D. Virol Sin. 2015 Oct;30(5):317-25. doi: 10.1007/s12250-015-3660-x. Epub 2015 Oct 22. PMID: 26511989 Free PMC article. Review.