Универсальные химерные антигенные рецепторы (CAR), экспрессируемые Т-клетками, имеют огромный потенциал для демократизации и улучшения лечения онкологических больных во всем мире. Причин для такого потенциала множество, но все они связаны с источником биологического материала, используемого для их производства. Поскольку универсальные CAR Т-клетки создаются из здоровых донорских Т-клеток третьих лиц, доноры могут быть тщательно отобраны для потенцирования, а клетки могут быть изготовлены, разработаны и тщательно контролироваться перед адоптивной передачей нескольким пациентам в аллогенном режиме.

Чтобы полностью реализовать свой потенциал в условиях аллогенной трансплантации, универсальные CAR Т-клетки не должны вызывать два пагубных и потенциально токсичных явления: реакцию "трансплантат против хозяина" (GvH) и реакцию "хозяин против трансплантата" (HvG). С реакцией GvH можно легко справиться путем преходящей или постоянной инактивации экспрессии Т-клеточного рецептора (TCRαβ) в CAR T-клетках^1-4. В отличие от этого, предотвращение истощения CAR Т-клеток в результате реакции HvG менее просто. Режим прекондиционирования, который обычно используется для лимфодеплеции пациентов перед пересадкой CAR Т-клеток (cyclophosphamide и fludarabine)^5,6, может задержать реакцию HvG и создать первое окно возможностей для приживления CAR Т-клеток. Однако, поскольку эта лимфодеплеция является преходящей, она не может полностью предотвратить реакцию HvG. Помимо подбора human leukocyte antigen (HLA) между донорами и реципиентами CAR T-клеток^7,8, две основные инженерные стратегии были тщательно проанализированы на предмет их способности дополнительно подавлять или задерживать реакцию HvG. Первая стратегия основана на разработке лекарственно-устойчивых CAR T-клеток, в которых инактивированы TCRαβ и гены, модулирующие чувствительность к лимфодеплецирующим препаратам (CD52 и dCK, отвечающим за связывание alE_mtuzumab и метаболизм fludarabine^2,9, соответственно). Эта стратегия, призванная обеспечить приживление и пролиферацию CAR Т-клеток в условиях длительной лимфодеплеции аллогенного хозяина, показала обнадеживающую противоопухолевую эффективность в клинических испытаниях в присутствии алемтузумаба^10,11. Вторая стратегия основана на генетической инактивации бета-2 микроглобулина (B2M) в CAR T-клетках. Инактивация B2M предотвращает экспрессию поверхностного маркера HLA класса I, который частично отвечает за опосредованную Т-клетками хозяина реакцию HvG^12-14. CAR Т-клетки TCRαβ(-) HLA-ABC(-) могут быть эффективно получены с помощью нескольких методов генного редактирования, они гипоиммуногенны по отношению к аллореспонсивным Т-клеткам^12-15, и в настоящее время оцениваются в клинических испытаниях фазы I.

Этот второй подход, часто представляемый как следующее поколение универсального лечения CAR T-клетками, предлагает потенциальное преимущество в продлении приживления CAR T-клеток, не полагаясь на длительную лимфодеплецию, которая повышает риск оппортунистических инфекций и снижает любые потенциальные преимущества, предоставляемые эндогенными иммунными эффекторами. Однако, несмотря на свою привлекательность, эта стратегия, вероятно, будет затруднена присутствием NK-клеток хозяина, которые распознают и легко истощают HLA-ABC(-) Т-клетки отсутствующей собственной реакции (self-response)¹². Клинические исследования, изучающие противоопухолевый потенциал HLA-ABC(-) CAR T-клеток, будут информативными, но трудно предсказать, восстановятся ли NK-клетки в количестве и пригодности для осуществления отсутствующего self-response после лимфодеплеции. Поэтому для реализации полного потенциала универсальных HLA-ABC(-) CAR T-клеток потребуются новые инженерные стратегии, которые позволят им уклоняться от атак NK-клеток хозяина.

Здесь мы сообщаем о разработке иммуно-уклоняющегося универсального CAR Т-клеточного каркаса под названием ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE, который включает разрушительные инсерции CAR и HLA-E, неполиморфного NK-ингибитора¹⁶ , в локусы TRAC и B2M, соответственно. Используя комбинацию мультиплексных TAL-эффекторных нуклеаз (TALEN) и рекомбинантного адено-ассоциированного вируса 6 (AAV6), мы показали, что ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE может быть эффективно получен, проявляет противоопухолевую активность и противостоит первичным аллореактивным Т-клеткам и первичным NK-клеткам, полученным от здоровых доноров и пациентов с острым миелоидным лейкозом (AML). Эти результаты демонстрируют иммуноразрушающие свойства ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE и поддерживают его использование в качестве готового универсального CAR T-клеточного продукта, совместимого с адоптивным переносом клеток в аллогенных условиях. Дальнейшая разработка процесса производства ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE должна быть выполнена с использованием соответствующих CAR-конструкций, сред GMP и материалов, прежде чем переходить к клинической оценке.

Эффективное производство ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE осуществляется путем нарушающих инсерций CAR и HLA-E в локусах TRAC и B2M, соответственно.

Для подавления цитолитической функции NK-клеток в отношении HLA-ABC(-) Т-клеток можно использовать несколько подходов^17-19. Для разработки надежного и простого подхода, совместимого с клиническим применением, мы решили использовать ген B2M для повторной экспрессии ингибитора NK HLA-E, используя подход с нарушающей вставкой генов (т.е. нокаут за нокаутом). Основываясь на подходе, описанном в ссылке 16, мы создали матрицу репарации ДНК без промотора AAV6, специфичную для локуса B2M; мы назвали эту матрицу HLA-E_m. Матрица HLA-E_m включает неамерный пептид, полученный из HLA-G (VMAPRTLIL^16,20,21), кодон-оптимизированные домены B2M и HLA-E, ковалентно связанные между собой GS-линкерами (HLA-E^16,22, рис. 1a), и 300-п.п. левый и правый гомологические рукава, специфичные для экзона 1 локуса B2M. HLA-E_m был разработан для использования в комбинации с B2M-специфичным TALEN, который инактивирует эндогенный ген B2M и перепрофилирует его регуляторные элементы и рамку считывания для экспрессии сконструированного HLA-E. В дальнейшем TALEN, специфичный для B2M, и HLA-E_m будут использоваться в комбинации с TRAC TALEN и матрицей CAR без промотора AAV6 (CARm, рис. 1a), описанной ранее, чтобы опосредовать разрушительную вставку конструкции CAR в локус TRAC²³.

Fig. 1: TALEN-mediated multiplex editing enables efficient CAR and HLA-E expression in TCRαβ/B2M double knockout T cells.

a SchE_matic showing the editing strategy at the TRAC and B2M loci to generate ΔTRAC_CARΔB2M_HLAET cells from wild-type T cells. b Experimental design for multiplex editing of TRAC and B2M loci using TALEN and adeno-associated viral (AAV6) particles and analysis of the resulting engineered T cells. c Representative flow-cytometry analysis of mock-transfected T cells and T cells engineered with different combinations of TALEN and AAV6 particles (CAR123m and HLA-E_m) c, top panel, flow-cytometry plots showing the frequency of TCRA and HLA-ABC expression in viable engineered T cells. c bottom panel, flow-cytometry plots showing the frequency of CAR and HLA-E expression detected among TCRαβ (-)/HLA-ABC(-) viable engineered T cells. The black bold box depicts the parent population. d Box plot showing the frequency of different subpopulations detected in engineered ΔTRAC_CAR22ΔB2M_HLAE T cells (left) and ΔTRAC_CAR123ΔB2M_HLAE (right). The gating strategy used to obtain the frequency of each subpopulation is illustrated by the black, red, green, and blue bold boxes in (c), right flow-cytometry panel). In each box plot, the central mark indicates the median, the bottom and top edges of the box indicate the interquartile range (IQR), and the whiskers represent the maximum and minimum data point. Each point represents one experiment performed with a given donor (n = 6 for ΔTRAC_CAR22ΔB2M_HLAE and n = 7 for ΔTRAC_CAR123ΔB2M_HLAE). Source data are provided as a Source Data file.

Целью данной работы была разработка иммуногенных универсальных CAR T-клеточных каркасов, способных противостоять атакам NK-клеток и аллореактивных T-клеток, и совместимых с адоптивным переносом клеток в аллогенной среде. Используя сочетание TALEN-опосредованного редактирования генов и AAV6-зависимой вставки генов, мы разработали гипоиммуногенный универсальный CAR T-клеточный каркас, который мы назвали ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE. ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE лишен экспрессии TCRαβ и HLA класса I и наделен искусственно созданным HLA-E, выведенным на поверхность. Эти три особенности позволяют CAR Т-клеткам предотвращать реакцию GvH и уклоняться от цитолитической активности аллореспонсивных Т-клеток и NK-клеток. Хотя мы подтвердили, что HLA-ABC(-) ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE преодолевают атаку аллореспонсивных Т-клеток, мы продемонстрировали их способность уклоняться от атаки NK-клеток путем значительного обогащения HLA-ABC(-) HLA-E(+) ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE в присутствии первичных NK-клеток от здоровых доноров и пациентов с AML. Как следствие, эта особенность позволила продлить противоопухолевую активность CAR Т-клеток в присутствии сверхстехиометрических уровней цитотоксических NK-клеток in vitro, что подтверждают недавние результаты, полученные с гипоиммуногенными Т-клетками, полученными из iPS-клеток³⁵. Мы также показали, что Т-клетки ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE проявляют противоопухолевую активность in vivo, аналогичную активности Т-клеток ΔTRAC_CAR T cells, демонстрируя, что их дополнительные гипоиммуногенные свойства не влияют на их цитолитические функции. Наконец, поскольку NK-клетки от здоровых доноров демонстрируют сходные фенотипические и фитнес-характеристики с NK-клетками от больных AML и ALL, независимо от стадии заболевания, мы прогнозируем, что экспрессия HLA-E, вероятно, защитит ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE от NK-клеток у большинства больных AML и ALL.

Ввиду сложности и исключительной эффективности иммунной системы человека, создание гипоиммуногенных клеточных каркасов, позволяющих осуществлять адоптивный перенос клеток в аллогенных условиях, долгое время оставалось сложной задачей. Однако недавнее развитие инструментов генного редактирования и растущее понимание механизмов отторжения аллотрансплантата позволили найти различные инженерные решения. Например, в области трансплантации индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека (hiPSC) и эмбриональных стволовых клеток человека (hESC) были предложены гипоиммуногенные клеточные каркасы^17-19,36. Одна из них заключается в избыточной экспрессии PD-L1, HLA-G и CD47 на поверхности плюрипотентных стволовых клеток, специально обедненных по HLA-A, HLA-B, HLA-C и HLA класса II^18,19. Было доказано, что эта стратегия иммунной маскировки эффективно предотвращает NK-клеточное, T-клеточное и макрофаг-зависимое истощение сконструированных человеческих плюрипотентных стволовых клеток. Эти результаты были подтверждены аналогичным исследованием, показавшим, что избыточная экспрессия CD47 на поверхности индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, лишенных поверхностных рецепторов HLA класса I и II, позволила им избегать иммунного отторжения¹⁸. Иммунное отторжение hESC также эффективно предотвращалось избыточной экспрессией PD-L1 и растворимого иммуноглобулина CTLA4 без инактивации HLA I и II классов³⁷.

Хотя эти стратегии привлекательны и выполнимы для инженерии стволовых клеток, они требуют многократного итеративного редактирования генов и антибиотик-зависимых этапов отбора, которые не очень хорошо подходят для процессов производства CAR Т-клеток. Кроме того, экспрессия некоторых маскирующих факторов, включая PD-L1, HLA-G и другие, может негативно сказаться на цитолитических функциях CAR Т-клеток, отчасти из-за склонности этих факторов к взаимодействию с ингибирующими рецепторами (PD1 и ILT-2/438), экспрессируемыми на поверхности Т-клеток. Кроме того, поскольку эти стратегии разработаны для максимального долгосрочного приживления плюрипотентных стволовых клеток, они направлены на блокирование всех возможных путей отторжения аллотрансплантата, включая Т-клеточное (HLA класса I и II/TCR), NK-клеточное (отсутствие HLA класса I/NKG2A) и макрофаг-зависимое (CD47) отторжение разработанных клеток. Такая высокая степень гипоиммуногенности может и не требоваться для эффективной противоопухолевой функции CAR T-клеток, поскольку преходящая активность CAR T-клеток коррелирует с положительным терапевтическим результатом^39-43. Более того, долгосрочное приживление CAR Т-клеток может быть связано с различными неблагоприятными событиями, включая аплазию В-клеток и бактериальную инфекцию, которые обычно наблюдаются при терапии аутологичными CAR Т-клетками CD19 и CD22^44,45,46. Таким образом, вместо того, чтобы разрабатывать CAR T-клетки для длительного поддержания в аллогенных условиях, наша стратегия была направлена на продление персистенции CAR T-клеток путем ингибирования наиболее важных путей отторжения аллотрансплантатов.

Отторжение аллотрансплантата происходит в основном под действием CD8(+) Т-клеток, CD4(+) Т-клеток, NK-клеток и, в меньшей степени, макрофагов⁴⁷. Однако в контексте терапии CAR Т-клетками относительный вклад этих типов клеток в отторжение аллотрансплантата может меняться в зависимости от их абсолютного количества и кинетики восстановления после режима прекондиционирования. Действительно, клинические данные, полученные из трех независимых когорт пациентов (ALL и крупные В-клеточные злокачественные опухоли), показали значительные различия в кинетике восстановления CD8(+), CD4(+) Т-клеток и NK-клеток после лечения аутологичными CD19 CAR Т-клетками и режима прекондиционирования (циклофосфамид и флударабин) ^48-50. Интересно, что CD8(+) Т-клетки и NK-клетки быстро восстанавливались до исходного уровня через 3-4 недели, в то время как CD4(+) Т-клетки восстанавливались значительно медленнее и у некоторых пациентов не вернулись к исходному уровню через 1-2 года после начала лечения. Таким образом, ожидается, что CD8(+) Т-клетки и NK-клетки хозяина будут играть ключевую роль в контроле продолжительности терапевтического действия аллогенных CAR Т-клеток, являясь первыми и основными факторами отторжения.

Хотя CD8(+) Т-клетки должны пройти через клональную экспансию, чтобы вызвать эффективную аллореакцию, они могут быть первым подмножеством, которое отторгает аллогенные CAR Т-клетки. Таким образом, инактивация HLA класса I на поверхности CAR T-клеток может эффективно ослабить такое отторжение и предложить начальное терапевтическое окно для уничтожения раковых клеток. Последующее восстановление NK-клеток хозяина может усложнить этот сценарий, распознавая и уничтожая HLA класса I-дефицитные CAR T-клетки без необходимости клональной экспансии. Встраивание ингибитора NK в CAR T клетки может еще больше продлить их персистенцию. Поэтому мы сосредоточились на создании CAR Т-клеток, которые могли бы уклоняться от цитолитической активности NK-клеток и аллореспонсивных CD8(+) Т-клеток. Для достижения этой цели мы стремились предотвратить экспрессию HLA класса I в CAR T-клетках путем инактивации B2M и наделить эти клетки ингибитором NK, находящимся на поверхности (HLA-E). Мы также рассматривали возможность инактивации TCRαβ для предотвращения GvHD, основного риска при пересадке аллотрансплантатов. Мы рассудили, что гены TRAC и B2M могут быть одновременно инактивированы и использованы в качестве посадочных площадок для вставки трансгенов (CAR и HLA-E). Мы предполагали, что эта стратегия упростит и ускорит процесс производства CAR Т-клеток и смягчит потенциальные генетические неблагоприятные события. Полученный клеточный каркас, ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE, может быть эффективно сгенерирован с помощью одновременной стратегии двойного нокаута и нокдауна. Комбинация обработки TRAC и B2M TALEN наряду с оптимизированным дизайном матриц восстановления AAV6 позволила нам получить высокую частоту TCRαβ(-) HLA-ABC(-) Т-клеток, экспрессирующих CAR и HLA-E. Эта инженерная стратегия совместима со стандартными универсальными процессами производства CAR Т-клеток, которые уже включают истощение TCRα β(+) Т-клеток, не требует обогащения HLA-E (+) CAR Т-клеток или антибиотик-зависимого этапа отбора и, таким образом, представляется подходящей для производства клинических продуктов.

Совместная обработка Т-клеток с TRAC и B2M TALEN не привела к значительной активности расщепления вне сайта. Это было продемонстрировано беспристрастным анализом OCA и высокопроизводительным секвенированием ДНК. Как и ожидалось, эта совместная обработка индуцировала транслокации между Chr14 и Chr15, в степени, аналогичной той, о которой сообщалось ранее с использованием различных инструментов редактирования генов^2,25,51,52. Поиск в базах данных по слиянию генов, включая Атлас генетики и цитогенетики в онкологии и гематологии, не выявил ни одной записи о патогенной транслокации между локусами TRAC и B2M (14q11 и 15q21.1, соответственно), что позволяет предположить, что серьезные нежелательные явления, связанные с таким слиянием генов, маловероятны. Хотя это ограничение может быть смягчено путем дальнейшего развития процесса, заключающегося в развязке редактирования TRAC и B2M на два-три дня, необходимо провести дополнительные доклинические исследования для оценки потенциальной токсичности таких транслокаций, прежде чем переходить к клиническим исследованиям. Кроме того, гомолог-зависимая вставка ремонтных матриц AAV6 была специфична для локусов TRAC и B2M и коррелировала с надежной экспрессией трансгенов. Тем не менее, мы обнаружили редкие гомолог-независимые вставки HLA-E_m и CARm в локусах TRAC и B2M, соответственно. Поскольку обе репарационные матрицы лишены промотора, ожидалось, что эти неправильные вставки не приведут к экспрессии трансгенов, если только они не вставлены в рамку с редактируемым геном. Мы не наблюдали экспрессии CAR в локусе B2M (Дополнительный рис. 1c, образец TLA 4), но обнаружили низкую, но обнаруживаемую экспрессию HLA-E в локусе TRAC (Дополнительный рис. 1c, образец TLA 2). Хотя мы не предполагаем критических неблагоприятных событий, связанных с экспрессией HLA-E по локусу TRAC, этот набор данных указывает на одно из ограничений этой стратегии мультиплексного редактирования генов, которое необходимо учитывать при разработке других продуктов клеточной терапии. Примечательно, что этот подход к вставке, опосредованный AAV6, был заметно более специфичным, чем случайная вставка трансгена, опосредованная лентивирусными частицами (Дополнительный рис. 1c, образец TLA 8).

Эффективно направленная вставка HLA-E_m в локус B2M приводит к надежной поверхностной экспрессии HLA-E, которая подавляет цитолитическую активность NK-клеток. В соответствии с предыдущими сообщениями^16,22, этот результат обусловлен структурой и идентичностью различных доменов модифицированного HLA-E. Ингибирующая способность HLA-E по отношению к NK-клеткам тесно связана с природой nonameric пептида, который задействован. Было показано, что его последовательность существенно влияет на сродство связывания комплекса HLA-E с ингибирующим рецептором NKG2A и активирующим рецептором NKG2C и, таким образом, сильно изменяет тонкий баланс, контролирующий активацию и ингибирование NK^20,21. Мы решили поместить на поверхность конструкции HLA-E nonameric последовательность VMAPRTLIL, поскольку она способствует более сильному вовлечению NKG2A, чем NKG2C, в отличие от других обычных пептидов, включая VMAPRTLFL (HLA-G-pep)^20-22. Результаты in vitro показали, что наша конструкция эффективно ингибирует NKG2A(+) NK-клетки от нескольких здоровых доноров и пациентов с AML. Однако, несмотря на выбранный нами пептид, HLA-E все еще может активировать NKG2C(+) NK-клетки, что приводит к быстрому истощению ΔTRAC_CARΔB2M_HLAET-клеток у доноров NKG2C>A. По причинам, описанным ранее, мы считаем, что одним из способов смягчения этой активации может быть идентификация неканонического неамерного пептида с ортогональной специфичностью к NKG2A и замена им VMAPRTLIL в сконструированной конструкции HLA-E.

Тем не менее, с клинической точки зрения, наши результаты позволяют предположить, что HLA-E-опосредованная защита ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE, вероятно, имеет место у подавляющего большинства пациентов с AML и ALL. Действительно, большинство этих пациентов являются NKG2^A>C (как и здоровые доноры) и, таким образом, имеют большую частоту NKG2A(+) NK-клеток, чем NKG2C(+) NK-клеток. Этот дисбаланс, наблюдаемый на разных стадиях заболевания (92% пациентов с NKG2^A>C наблюдались на стадии диагностики, полной ремиссии и рефрактерности к рецидивам, рис. 5b), как ожидается, будет способствовать уклонению ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE от NK-клеток и, таким образом, потенциально продлевать их общую персистенцию, хотя это должно быть продемонстрировано в клинических условиях. Определение соотношения NKG2A(+)/NKG2C(+) до введения пациентам было бы полезно для полного использования терапевтического потенциала ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE.

Экспрессия HLA-E на поверхности HLA-ABC(-) CAR Т-клеток не является единственной стратегией, позволяющей избежать цитолитической активности NK-клеток. Действительно, одним из альтернативных подходов может быть предотвращение экспрессии ключевых поверхностных рецепторов Т-клеток, участвующих в активации NK-клеток. К таким рецепторам относятся MIC-A/B, рецепторы семейства SLAM CD48 и CD229, лиганд NKP46, B7H3 и CD155 - различные рецепторы, которые, как известно, активируют NK-клетки через вовлечение их когнатных рецепторов CD244, CD229, NKP46, IL20ra и KIR2DL5A, соответственно^36,53-56. Генетическая отмена или снижение регуляции этих рецепторов может ослабить активацию NK-клеток, вызванную отсутствием MHC класса I. Хотя для оценки надежности и клинической применимости этого подхода необходима дальнейшая работа, недавний отчет продемонстрировал, что избыточная экспрессия убиквитин-лигазы E5 вируса герпеса-8 человека в клеточных линиях K562 или Т-клетках может смягчить их истощение NK-клетками через гипотетическое снижение регуляции MIC-A/B57. Другой альтернативной стратегией может быть наделение сконструированных Т-клеток цитолитической активностью в отношении NK-клеток. Эта стратегия была элегантно исследована Mo и др.⁵⁸ , которые недавно показали, что создание CAR Т-клеток с рецептором аллоиммунной защиты (ADR), специфичным для 4-1BB, позволило им эффективно притупить реакцию HvG, активно нацеливаясь на активированные NK-клетки и аллореактивные Т-клетки.

Конечная цель универсального продукта CAR T-клеток - обеспечить эффективное и специфическое истощение раковых клеток в аллогенных условиях с минимальным биологическим и токсикологическим следом. Наша стратегия была разработана для смягчения таких последствий, позволяя CAR T-клеткам обходить иммунную систему хозяина пассивно и локально, не полагаясь на активное, системное и длительное лимфодеплецию. Одним из потенциальных преимуществ по сравнению с ранее описанными стратегиями^2,9,58 является сохранение эндогенных иммунных эффекторов и возможность их совместной работы с CAR T-клетками в борьбе против раковых клеток. Такое сотрудничество может быть особенно полезным в контексте лечения солидных опухолей, где эндогенные иммунные эффекторы, включая тканевые клетки памяти^59,60, опухоль-инфильтрирующие лимфоциты⁶¹ и другие клеточные подмножества уже оснащены и готовы к уничтожению опухолевых антиген- и неоантиген-экспрессирующих клеток. Сохранение функциональных эндогенных иммунных эффекторов также может стать ключевым преимуществом для повышения эффективности CAR T-клеточной терапии, позволяя проводить комбинированную терапию с онколитическими вирусами⁶², усиливающими вакцинами⁶³, биспецифическими агентами⁶⁴ или другими иммунотерапиями на основе антител⁶⁵. Мы считаем, что ΔTRAC_CARΔB2M_HLAE может позволить проводить множество соответствующих комбинированных терапий, которые позволят использовать весь потенциал иммунной системы человека и улучшить терапевтический результат адоптивной клеточной терапии в аллогенных условиях.

Подводя итог, мы сообщаем о разработке иммунораздражающего универсального CAR Т-клеточного каркаса, дефицитного по TCRαβ и HLA класса I и наделенного ингибитором NK HLA-E на поверхности. Эти свойства делают его совместимым с адоптивным переносом клеток в аллогенных условиях, предотвращая GvHD и позволяя ему уклоняться от цитолитической активности NK-клеток и аллореспонсивных CD8(+) Т-клеток, двух основных участников отторжения HvG. Эти гипоиммуногенные свойства потенциально могут продлить персистенцию универсальных CAR T-клеток и, следовательно, повысить их противоопухолевую эффективность в иммунокомпетентном организме, хотя это должно быть продемонстрировано в клинических условиях. Наша инженерная стратегия является эффективной и специфичной, переносимой на различные конструкции CAR и адаптируемой к традиционным процессам производства CAR T-клеток. Мы считаем, что это следующее поколение универсальных CAR T-клеток имеет потенциал для улучшения терапевтических результатов готовых терапевтических T-клеточных продуктов и их широкомасштабного использования против множества злокачественных опухолей на благо более широкого круга пациентов.