Эпителиальные клетки посредством -обусловленной межклеточной адгезии взаимодействуют и дают 'cobblestone morphology' эпителиальных колоний. Клетки м. терять это свойство и становиться инвазивными. Walter Birchmeier, Yasuyuki Fujita и др., идентифицировали белок Hakai, который способствует эндоцитозу E-cadherin.
Активация тирозин киназы такой как или заставлет эпителиальные клетки приобретать фибробласт-подобную морфологию и распределение. E-cadherin распределен во внутриклеточном компартменте, будучи эндоцитозирован. Установлено, что E-cadherin не только модифицируется этими киназами ( фосфорилирование тирозина), но и ubiquitylated.
Birchmeier's группа клонировала Hakai — (японское обозначение 'destruction' —), который взаимодействует специфически с E-cadherin phosphorylation-зависимым способом по тирозинам 756 и 757.
Помимо phosphotyrosine-связывающего домена Hakai содержит на своем N-терминальном конце и большой процент (35%) пролиновых остатков на своем С-конце. Этим он напоминает, E3 ubiquitin лигазу, которая распознает tyrosine-phosphorylated receptor kinases. Было показано, что Src-homology-2 () домен сопровождает RING и Zn-finger домен в Hakai. Это происходит в обратной последовательности в c-Cbl, но в целом, оба домена, по-видимому, ранжированы очень сходно.
На основании этой структурной гомологии, авт. изучали способность Hakai's увеличивать E-cadherin ubiquitylation. Они показали, что в присутствии Hakai, активных Src и E2 ubiquitin-conjugating энзимов, E-cadherin строго ubiquitylated. Они показали, что тирозиновые остатки E-cadherin, которые взаимодействуют с Hakai являются критическими для ubiquitylation.
Что происходит, когда E-cadherin ubiquitylated? Клетки, трансфицированные Hakai уплощаются и формируют колонии нерегулярной формы. Период полу-жизни E-cadherin снижается и его локализация в межклеточных контактах становится менее регулярной. Это является результатом интернализациии E-cadherin, это ослабляет агрегацию клеток и увеличивает рассеивание клеток.
Предполагается, что Hakai регулирует подвижность клеток путем индукции ubiquitylation и эндоцтитоза E-cadherin. В ответ на tyrosine-kinase-обусловленное фосфорилирование E-cadherin, Hakai рекрутируется — посредством SH2-домен взаимодействий — с E-cadherin, где он функционирует как E3 ubiquitin лигаза, чтобы обеспечить ее убиквитилирование и последующий эндоцитоз из межклеточных контактов.
См. также Cadherin E and Hakai
См. также Cadherin E and Hakai